Методы оценки антиоксидантного статуса растений (200,00 руб.)

Стр.1

Стр.2

Стр.3

Стр.4

Стр.5

Стр.71

Стр.72

Стр.73

Стр.74

Стр.75

Стр.1

Стр.2

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ УРАЛЬСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ ПЕРВОГО ПРЕЗИДЕНТА РОССИИ Б. Н. ЕЛЬЦИНА МЕТОДЫ ОЦЕНКИ АНТИОКСИДАНТНОГО СТАТУСА РАСТЕНИЙ Рекомендовано методическим советом УрФУ в качестве учебно-методического пособия для студентов, обучающихся по программе бакалавриата по направлению подготовки 020400 «Биология» Екатеринбург Издательство Уральского университета 2012 1

Стр.3

УДК 581.198(07) М545 Составители: Г. Г. Борисова, М. Г. Малева, Г. Ф. Некрасова, Н. В. Чукина Ответственный редактор Н. В. Чукина Рецензенты: лаборатория экологической физиологии растений Института биологии Коми НЦ УрО РАН (заведующая лабораторией доктор биологических наук, профессор Т. К. Головко); Е. И. Лихачева, кандидат технических наук, доцент кафедры пищевой биотехнологии (Уральский государственный экономический университет) Методы оценки антиоксидантного статуса растений : [учеб.-метод. пособие] / Г. Г. Борисова и др. ; отв. ред. Н. В. Чукина. – Екатеринбург : Изд-во Урал. ун-та, 2012. – 72 с. ISBN 978-5-7996-0738-8 В учебно-методическом пособии отражены общие представления об окислительном стрессе у растений и антиоксидантных системах, представлены методики определения индикаторов окислительного стресса, низкомолекулярных антиоксидантов, тиолов, активности ферментов антиоксидантной защиты и содержания белков. Пособие предназначено для студентов биологического факультета разных уровней подготовки (бакалавров, специалистов, магистров) и может быть использовано аспирантами. ISBN 978-5-7996-0738-8 2 © Уральский федеральный университет, 2012

Стр.4

От составителей Окислительный стресс у растений возникает в результате действия различных неблагоприятных факторов внешней среды, которые, как правило, вызывают образование в их клетках повышенного количества активных форм кислорода (АФК), отличающихся высокой реакционной способностью. Под действием АФК происходит окислительное повреждение жизненно важных систем (например, перекисное окисление липидов – ПОЛ). В ответ на окислительный стресс у растений индуцируется антиоксидантная защитная система (АОС). Она представлена низкомолекулярными соединениями, антиоксидантными ферментами, а также SH-обогащенными белками, способными нейтрализовать токсичные радикалы и связать избыток поллютантов. Учебно-методическое пособие состоит из двух разделов. Первый раздел – теоретический. В нем отражены общие представления об окислительном стрессе у растений и их антиоксидантных системах, приведен перечень вопросов для самопроверки знаний и указана рекомендуемая литература. Второй раздел представляет собой лабораторный практикум. Здесь показаны методы определения индикаторов повреждения систем клеток, некоторых АФК, компонентов АОС (низкомолекулярных антиоксидантов, тиолов и ферментов антиоксидантной защиты), а также содержания белков как вспомогательного показателя, необходимого для расчета удельной активности ферментов. Описанные методики апробированы в многочисленных опытах и могут быть успешно использованы при изучении антиоксидантного статуса растений. Данное учебно-методическое пособие предназначено для студентов-биологов разных уровней подготовки. Оно может использоваться бакалаврами (направление 020400) при проведении специального практикума по физиологии и биохимии растений; студентами-магистрантами при выполнении блока лабораторно-практических занятий в рамках специальных курсов («Физиология стресса», «Энзимология» и др.) в соответствии с магистерской программой «Физиология и биохимия растений», а также аспирантами при проведении экспериментальных исследований. 3

Стр.5

Cодержание От составителей ............................................................................................ 3 Раздел 1. ОБЩИЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ ОБ ОКИСЛИТЕЛЬНОМ СТРЕССЕ И АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЕ РАСТЕНИЙ.............. 4 Вопросы для самоконтроля ....................................................................... 15 Список рекомендуемой литературы ......................................................... 17 Раздел 2. ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ ........................................... 18 Определение перекисного окисления липидов ....................................... 18 Определение супероксидного аниона ...................................................... 22 Определение пероксида водорода ............................................................ 24 Определение содержания водорастворимых антиоксидантов .............. 26 Определение аскорбиновой кислоты ....................................................... 29 Определение аскорбиновой кислоты и восстановленного глутатиона ................................................................................................. 31 Определение флавоноидов ........................................................................ 35 Определение антоцианов ........................................................................... 38 Определение свободного пролина ............................................................ 40 Определение SH-групп с реактивом Элмана ........................................... 43 Определение активности супероксиддисмутазы .................................... 48 Определение активности глутатионредуктазы ....................................... 53 Определение активности гваякол-пероксидазы ...................................... 56 Определение активности аскорбатпероксидазы ..................................... 59 Определение активности каталазы ........................................................... 61 Определение растворимого белка по Брэдфорду ................................... 63 Определение растворимого и мембранно-связанного белка по Шактерле ......................................................................................... 64 Список библиографических ссылок ......................................................... 67 69

Стр.71

Учебное издание МЕТОДЫ ОЦЕНКИ АНТИОКСИДАНТНОГО СТАТУСА РАСТЕНИЙ Учебно-методическое пособие Составители: Борисова Галина Григорьевна Малева Мария Георгиевна Некрасова Галина Федоровна Чукина Надежда Владимировна Зав. редакцией М. А. Овечкина Редактор В. И. Попова Корректор В. И. Попова Оригинал-макет Н. П. Сорокиной 70

Стр.72

План выпуска 2012 г. Подписано в печать 25.09.2012. Формат 60×841/16. Бумага офсетная. Гарнитура Timеs. Уч.-изд. л. 3,9. Усл. печ. л. 4,18. Тираж 80 экз. Заказ 1388. Издательство Уральского университета 620000, г. Екатеринбург, пр. Ленина, 51. Отпечатано в ИПЦ УрФУ 620000, Екатеринбург, ул. Тургенева, 4. Тел.: + (343) 350-56-64, 350-90-13 Факс: +7 (343) 358-93-06 E-mail: press.info@usu.ru 71

Стр.73

Для заметок 72

Стр.74

Стр.75