Национальный цифровой ресурс Руконт - межотраслевая электронная библиотека (ЭБС) на базе технологии Контекстум (всего произведений: 611265)
Контекстум
Физиология растений  / №2 2017

ИДЕНТИФИКАЦИЯ И АКТИВНОСТЬ СУПЕРОКСИД-ПРОДУЦИРУЮЩИХ БЕЛКОВЫХ КОМПЛЕКСОВ ПЛАЗМАЛЕММЫ ПРИ ДЕЙСТВИИ НИЗКОЙ ПОЛОЖИТЕЛЬНОЙ ТЕМПЕРАТУРЫ НА ЭТИОЛИРОВАННЫЕ ПРОРОСТКИ КУКУРУЗЫ (200,00 руб.)

0   0
Первый авторПиотровский
АвторыЛаптева Т.А., Жесткова И.М., Трофимова М.С.
Страниц9
ID591506
АннотацияИсследовали кинетику генерации изолированной плазмалеммой супероксид-анион радикала по скорости образования формазана из ХТТ в присутствии НАДФ·Н или НАД·Н. Плазмалемму получали из этиолированных проростков кукурузы, выращенных при 25°С, а также из проростков, которые в течение последних суток находились при 6°С. Мембранные везикулы из контрольных растений обладали супероксид-продуцирующей активностью, причем скорость окисления НАД·Н была существенно выше, чем НАДФ·Н. Пребывание проростков при низкой температуре приводило к снижению активности с НАДФ·Н, в то время как НАД·Н-зависимая незначительно возрастала. При помощи нативного электрофореза высокого разрешения (hrCN-PAGE) солюбилизированную додецил мальтозидом (ДДМ) плазмалемму разделяли на мультибелковые комплексы с целью выявления тех, которым свойственна супероксид-продуцирующая активность и чувствительность к ингибированию дифенилен иодониумом. Обнаружено, что супероксид-продуцирующей активностью в присутствии НАДФ·Н или НАД·Н обладало несколько белковых комплексов плазмалеммы. Максимальную активность, которая ингибировалась дифенилен иодониумом, проявлял высокомолекулярный комплекс, в котором детектировались белки, реагирующие с антителами против С-терминального пептида оксидазы фагоцитов (gp91phox). Активность этого комплекса в опытном варианте была снижена по сравнению с контрольным и обнаруживала большее сродство к НАДФ·Н, чем к НАД·Н. Для выявления изменений в полипептидном составе белковых комплексов в ответ на снижение температуры выращивания использовали двумерный дифференциальный электрофорез (hrCN/SDS-PAGE), разделяя в одном геле контрольные и опытные образцы плазмалеммы, помеченные по лизину флуоресцентными цианиновыми красителями Су2 и Су3 соответственно. Снижение температуры выращивания изменяло белковый состав высокомолекулярного комплекса: отмечено появление новых белков и отсутствие нескольких полипептидов, которые были в контрольном варианте. По интенсивности иммуноокрашивания содержание белков, выявляемых с антителами против gp91phox, в опытном и контрольном вариантах существенно не различалось. Таким образом, при действии низкой температуры высокомолекулярный комплекс, содержащий НАДФ·Н-оксидазу, теряет белки, что может снижать его супероксид-продуцирующую активность.
УДК581.1
ИДЕНТИФИКАЦИЯ И АКТИВНОСТЬ СУПЕРОКСИД-ПРОДУЦИРУЮЩИХ БЕЛКОВЫХ КОМПЛЕКСОВ ПЛАЗМАЛЕММЫ ПРИ ДЕЙСТВИИ НИЗКОЙ ПОЛОЖИТЕЛЬНОЙ ТЕМПЕРАТУРЫ НА ЭТИОЛИРОВАННЫЕ ПРОРОСТКИ КУКУРУЗЫ / М.С. Пиотровский [и др.] // Физиология растений .— 2017 .— №2 .— С. 55-63 .— URL: https://rucont.ru/efd/591506 (дата обращения: 06.05.2025)

Предпросмотр (выдержки из произведения)

133–141 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ СТАТЬИ УДК 581.1 ИДЕНТИФИКАЦИЯ И АКТИВНОСТЬ СУПЕРОКСИД-ПРОДУЦИРУЮЩИХ БЕЛКОВЫХ КОМПЛЕКСОВ ПЛАЗМАЛЕММЫ ПРИ ДЕЙСТВИИ НИЗКОЙ ПОЛОЖИТЕЛЬНОЙ ТЕМПЕРАТУРЫ НА ЭТИОЛИРОВАННЫЕ ПРОРОСТКИ КУКУРУЗЫ © 2017 г. М. С. Пиотровский, Т. А. Лаптева, И. М. Жесткова, М. <...> К.А. Тимирязева РАН, Москва, Россия Поступила в редакцию 24.06.2016 г. Исследовали кинетику генерации изолированной плазмалеммой супероксид-анион радикала по скорости образования формазана из ХТТ в присутствии НАДФ·Н или НАД·Н. <...> Плазмалемму получали из этиолированных проростков кукурузы, выращенных при 25°С, а также из проростков, которые в течение последних суток находились при 6°С. <...> Мембранные везикулы из контрольных растений обладали супероксид-продуцирующей активностью, причем скорость окисления НАД·Н была существенно выше, чем НАДФ·Н. <...> Пребывание проростков при низкой температуре приводило к снижению активности с НАДФ·Н, в то время как НАД·Н-зависимая незначительно возрастала. <...> При помощи нативного электрофореза высокого разрешения (hrCN-PAGE) солюбилизированную додецил мальтозидом (ДДМ) плазмалемму разделяли на мультибелковые комплексы с целью выявления тех, которым свойственна супероксид-продуцирующая активность и чувствительность к ингибированию дифенилен иодониумом. <...> Обнаружено, что супероксид-продуцирующей активностью в присутствии НАДФ·Н или НАД·Н обладало несколько белковых комплексов плазмалеммы. <...> Максимальную активность, которая ингибировалась дифенилен иодониумом, проявлял высокомолекулярный комплекс, в котором детектировались белки, реагирующие с антителами против С-терминального пептида оксидазы фагоцитов (gp91phox). <...> Активность этого комплекса в опытном варианте была снижена по сравнению с контрольным и обнаруживала большее сродство к НАДФ·Н, чем к НАД·Н. <...> Для выявления изменений в полипептидном составе белковых комплексов в ответ на снижение температуры выращивания использовали двумерный дифференциальный <...>