Национальный цифровой ресурс Руконт - межотраслевая электронная библиотека (ЭБС) на базе технологии Контекстум (всего произведений: 634942)
Контекстум
Руконтекст антиплагиат система
Инфекционные болезни  / №4 2016

МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИЗОТИПА КОР-АНТИГЕНА ВИРУСА ГЕПАТИТА С (176,00 руб.)

0   0
Первый авторКайшева
АвторыИванов Ю.Д., Французов П.А., Учайкин В.Ф., Конев В.А., Арчаков А.И.
Страниц5
ID564977
АннотацияЦель. Предложить способ определения изоформы кор-антигена вируса гепатита С в сыворотке крови человека Материалы и методы. Материалом исследования служили образцы сывороток крови, полученные от пациентов, инфицированных вирусным гепатитом С по данным ПЦР. С помощью аффинных реагентов, в качестве которых выступали плоские чипы с иммобилизованными на поверхности моноклональными антителами против кор-антигена вирусного гепатита С, осуществлялось концентрирование целевого белка. Регистрацию пептидных фрагментов молекул, сконцентрированных на поверхности плоских чипов, выполняли на времяпролетном масс-спектрометре Autoflex III MALDI-TOF/TOF (Bruker Daltonics, Германия). Идентификацию белков проводили с помощью протеомной поисковой машины Mascot с достоверностью более 95%. Результаты. Было проведено обогащение поверхности аффинных реагентов молекулами кор-антигена из пятнадцати образцов сыворотки крови пациентов, инфицированных вирусным гепатитом С, с последующей прямой масс-спектрометрической идентификацией. В 14 образцах были выявлены изоформы кор-антигена Q8V7V3, Q66VB3, O71242, соответствующие генотипу 1b и изоляту HC-J2, в одном образце – изоформа Q68692, соответствующая генотипу 2с, изоляту HC-J7. В большинстве образцов сывороток крови (в 12 образцах из 15) была выявлена изоформа Q8V7V3. Гомологичность аминокислотных последовательностей всех четырех изоформ составила 89–96%. Заключение. Предложен новый способ определения изоформы кор-антигена вирусного гепатита С в образцах биоматериала. Способ основан на комбинации специфического обогащения поверхности аффинных реагентов молекулами целевого белка с последующей масс-спектрометрической идентификацией. Масс-спектрометрический анализ позволяет не только достоверно идентифицировать кор-антиген вирусного гепатита С в образце биоматериала, но и определить его изоформу.
МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИЗОТИПА КОР-АНТИГЕНА ВИРУСА ГЕПАТИТА С / А.Л. Кайшева [и др.] // Инфекционные болезни .— 2016 .— №4 .— С. 52-56 .— URL: https://rucont.ru/efd/564977 (дата обращения: 03.05.2024)

Предпросмотр (выдержки из произведения)

51–55 Масс-спектрометрическое определение изотипа кор-антигена вируса гепатита С А. <...> Арчаков1 1НИИ биомедицинской химии имени В.Н.Ореховича, Москва, Российская Федерация; 2ООО «ПостгенТех», Москва, Российская Федерация; 3 Российский национальный исследовательский медицинский университет им. <...> Материалом исследования служили образцы сывороток крови, полученные от пациентов, инфицированных вирусным гепатитом С по данным ПЦР. <...> С помощью аффинных реагентов, в качестве которых выступали плоские чипы с иммобилизованными на поверхности моноклональными антителами против кор-антигена вирусного гепатита С, осуществлялось концентрирование целевого белка. <...> Регистрацию пептидных фрагментов молекул, сконцентрированных на поверхности плоских чипов, выполняли на времяпролетном масс-спектрометре Autoflex III MALDI-TOF/TOF (Bruker Daltonics, Германия). <...> Идентификацию белков проводили с помощью протеомной поисковой машины Mascot с достоверностью более 95%. <...> Было проведено обогащение поверхности аффинных реагентов молекулами кор-антигена из пятнадцати образцов сыворотки крови пациентов, инфицированных вирусным гепатитом С, с последующей прямой масс-спектрометрической идентификацией. <...> В 14 образцах были выявлены изоформы кор-антигена Q8V7V3, Q66VB3, O71242, соответствующие генотипу 1b и изоляту HC-J2, в одном образце – изоформа Q68692, соответствующая генотипу 2с, изоляту HC-J7. <...> Гомологичность аминокислотных последовательностей всех четырех изоформ составила 89–96%. <...> Предложен новый способ определения изоформы кор-антигена вирусного гепатита С в образцах биоматериала. <...> Способ основан на комбинации специфического обогащения поверхности аффинных реагентов молекулами целевого белка с последующей масс-спектрометрической идентификацией. <...> Масс-спектрометрический анализ позволяет не только достоверно идентифицировать кор-антиген вирусного гепатита С в образце биоматериала, но и определить его изоформу. <...> Ключевые слова: аффинное обогащение, изоформа <...>