ОАО «ИздАтельствО
"МедИцИнА"»
рОссИЙсКая аКаДеМИя МеДИЦИнсКИХ наУК
ИнсТИТУТ ИММУнОЛОГИИ ФеДераЛЬнОГО МеДИКО-БИОЛОГИЧесКОГО аГенТсТва
АдРес РедАКцИИ:
Москва,
ул. Скотопрогонная, д.29/1,
подъезд 15
E-mail: oao-meditsina@mail.ru
www.medlit.ru
ЛР № 010215 от 29.04.97
Все права защищены. Ни одна часть этого
издания не может быть занесена в память
компьютера либо воспроизведена любым
способом без предварительного письменного
разрешения издателя.
Сведения о статьях, публикуемых в журнале
"Иммунология", помещаются в Excerpta
Medica; Biological Abstracts; Chemical
Abstracts; INIS Atomindex (International
Nuclear Information System); Ulrich's International
Periodicals Directory.
ИММУНОЛОГИЯ
Двухмесячный научно-практический журнал
ОснОван в январе 1980 г.
Журнал входит в перечень периодических научно-технических изданий,
рекомендуемых ВАК Российской Федерации
для публикации основных результатов диссертаций на соискание
ученой степени кандидата и доктора наук
Том 35
Отдел РеКлАМЫ
Тел. 8 (495) 678-64-84
Ответственность за достоверность
информации, содержащейся в рекламных
материалах, несут рекламодатели
Редактор Е. К. Константинова
Художественный редактор
М. Б. Белякова
Технический редактор Т. В. Нечаева
Корректор Л.В. Кузнецова
Верстка Е. М. Архипова
Сдано в набор 01.09.2014.
Подписано в печать 23.10.2014.
Формат 60 Ч 88 1/8.
Печать офсетная.
Печ. л. 8,00.
Усл. печ. л. 5,88.
Уч.-изд. л. 8,3.
Заказ 557.
Отпечатано в ООО "Подольская
Периодика", 142110, г. Подольск,
ул. Кирова, 15
Индекс 71492 – для индивидуальных
подписчиков
Индекс 71493 – для предприятий и
организаций
ISSN 0206-4952. Иммунология. 2014.
Т. 35. № 5. 233—296.
5
2014
сенТяБрЬ – ОКТяБрЬ
Главный редактор академик РАН Р. М. ХаИТОв
РЕДАКЦИОННАЯ КОЛЛЕГИЯ:
Л. П. АЛЕКСЕЕВ, член-корр. РАМН, профессор, доктор мед. наук, Р. И. АТАУЛЛАХАНОВ,
профессор, доктор мед. наук, Ф.Ю. ГАРИБ, профессор, доктор
мед. наук (научный редактор), Г. О. ГУДИМА, профессор, доктор биол. наук,
И. С. ГУЩИН, член-корр. РАМН, профессор, доктор мед. наук, Н. И. ИЛЬИНА,
профессор, доктор мед. наук, З. Г. КАДАГИДЗЕ, профессор, доктор мед. наук,
Э. В. КАРАМОВ, профессор, доктор биол. наук, А. В. КАРАУЛОВ, член-корр.
РАМН, доктор мед. наук, профессор, Н. В. МЕДУНИЦЫН, академик РАМН,
доктор мед. наук, Р. В. ПЕТРОВ, академик РАН, Б. В. ПИНЕГИН (зам. главного
редактора), профессор, доктор мед. наук, Ю. П. РЕЗНИКОВ, профессор, доктор
мед. наук, И. Г. СИДОРОВИЧ, профессор, доктор мед. наук, А. С. СИМБИРЦЕВ,
профессор, доктор мед. наук, А. В. ФИЛАТОВ, профессор, доктор биол. наук,
И. С. ФРЕЙДЛИН, член-корр. РАМН, доктор мед. наук, М. Р. ХАИТОВ,
доктор мед. наук
РЕДАКЦИОННЫЙ СОВЕТ:
Г. И. АБЕЛЕВ (Москва), Т. У. АРИПОВА (Ташкент), С. С. ГАМБАРОВ (Ереван),
А. В. ЕМЕЛЬЯНОВ (Санкт-Петербург), В. А. КОЗЛОВ (Новосибирск), Л. В. ЛУСС
(Москва), А. Н. МАЯНСКИЙ (Нижний Новгород), М. П. ПОТАПНЕВ (Минск),
М. З. САИДОВ (Махачкала), Р. И. СЕПИАШВИЛИ (Москва), Л. А. СИЗЯКИНА
(Ростов-на-Дону), Н. Ю. СОТНИКОВА (Иваново), И. А. ТУЗАНКИНА (Екатеринбург),
В. А. ЧЕРЕШНЕВ (Екатеринбург)
Зав. редакцией журнала Галина Ивановна ГАВРИКОВА
e-mail: gigavr@yandex.ru
Стр.1
IZDATEL'STVO
MEDITSINA
RUSSiAn AcADeMY OF MeDicAL ScienceS
inSTiTUTe OF iMMUnOLOGY OF FeDeRAL MeDicAL AnD BiOLOGicAL AGencY
MOSCOW
115088, Moscow,
Novoostapovskaya str., 5,
building 14
Tel.:+7(495) 670-65-94
E-mail: gigavr@yandex.ru
www.medlit.ru
ЛР № 010215 от 29.04.97
IMMUNOLOGIYA
IMMUNOLOGY
Bimonthly scientific-practical Journal
Since 1980
Volume 35
5
2014
SePTeMBeR – OcTOBeR
editor-in-chief Rakhim KHAITOV,
MD, PhD, DSc, Prof., academician of RAS
THE EDITORIAL BOARD:
LEONID ALEXEEV, corresponding member of RAMS, MD, PhD, Dsc., prof.,
RAvShAn AtAullAkhAnov, MD, PhD, Dsc., prof., FIRuZ GARIB, MD,
PhD, Dsc., prof., GeoRGIy GuDIMA, DBS, PhD, Dsc., prof., IGoR GuShCHIN,
corresponding member of RAMS, MD, PhD, Dsc., prof., NATALIA
IlynA, MD, PhD, Dsc., prof., ZAIRA kADAGIDZe, MD, PhD, Dsc., prof.,
eDwARD kARAMov, DBS, PhD, Dsc., AlexAnDeR kARAulov, corresponding
member of RAMS, MD, PhD, Dsc., prof., nIckolAy MeDunItSyn,
Academicial of RAMS, MD, PhD, Dsc., ReM PetRov, Academicial of RAn and
RAMS, BoRIS PIneGIn (Deputy editor), MD, PhD, Dsc., prof., yuRI ReSnIkov,
MD, PhD, Dsc., prof., IGoR SIDoRovIch, MD, PhD, Dsc., prof., AnDRey SIMBIRtStev,
MD, PhD, Dsc., prof., AlexAnDeR FIlAtov, DBS, PhD, Dsc., prof.,
IRInA FReyDlInA, corresponding member of RAMS, MD, PhD, Dsc., prof., MuSA
khAItov, MD, PhD, Dsc.
the e DI toRIAl S tAFF:
ISSN 0206-4952
GARRy ABelev (Moscow), tAMARA ARIPovA (tashkent), SPARtAk GAMBARov
(erevan), AlexAnDeR eMel’yAnov (St. Petersburg), vlADIMIR koZlov (novosibirsk),
luDMIlA luSS (Moscow), AnDRew MAyAnSky (nizhny novgorod), ALexAnDeR
MIkhAylenko (tver), MIchAIl PotAPnev (Minsk), MARAt SAIDov
(Makhachkala), RevAZ SePIAShvIlI (Moscow), luDMIlA SIZyAkInA (Rostov-onDon),
nAtAlIA SotnIkovA (Ivanovo), IRInA tuZAnkInA (ekaterinburg), vAleRy
cheReShnev (ekaterinburg)
Izdatel’stvo Meditsina
Стр.2
СОДЕРЖАНИЕ
МОЛЕКУЛЯРНАЯ ИММУНОЛОГИЯ И ИММУНОГЕНЕТИКА
Данилко К.В., Назарова Л.Ш., Каримов Д.О., Целоусова
О.С., Волкова А.Т., Катаев В.А., Малиевский В.А.,
Викторова Т.В. Однонуклеотидная замена -173G>C
гена фактора ингибирования миграции макрофагов и
предрасположенность к развитию ювенильных артритов
.............................................
Сенцова Т.Б., Кириллова О.О., Тутельян В.А., Ворожко
И.В., Ревякина В.А., Гаппарова К.М. Генетические
маркеры метаболизма в оценке цитокинового статуса у
больных с ожирением ............................
Баратова Д.А., Джапаркулова А.Д., Нурлыханов Е.Б.,
Баратова М.А. Иммуногенетическая характеристика
I и II классов аллелей HLA-главного комплекса гистосовместимости
у потенциальных доноров гемопоэтических
стволовых клеток .........................
КЛЕТОЧНАЯ ИММУНОЛОГИЯ
Малайцев В.В., Богданова И.М. Индуцируемая опухолевыми
клетками активация системы врожденного иммунитета
в популяции клеток селезенки интактных мышей
in vitro ..........................................
Панченко Л.Ф., Моисеев В.С., Пирожков С.В., Теребилина
Н.Н., Наумова Т.А., Баронец В.Ю., Гончаров
А. Характеристика иммунокомпетентных клеток крови
больных дилатационной кардиомиопатией алкогольного
генеза и неалкогольной кардиомиопатией ишемического
типа – сравнительная роль воспаления Тх1-, Тх2и
Тх17-классов ..................................
Стручко Г.Ю., Москвичев Е.В., Меркулова Л.М., Кострова
О.Ю., Михайлова М.Н. Морфологическая
картина и иммуногистохимический фенотип тимуса после
введения полиоксидония ......................
РЕГУЛЯЦИЯ ИММУНИТЕТА
Крутецкая И.Ю., Самойлович М.П., Климович В.Б.,
Климович А.В. Моноклональные антитела к белку
Тамма–Хорсфолла: эпитопная специфичность и применение
в иммуноанализе ........................
Тюренков И.Н., Гумилевский Б.Ю., Филина И.С., Самотруева
М.А., Бакулин Д.А. Влияние гидрохлорида
бета-фенилглутаминовой кислоты (РГПУ-135, нейроглутама)
на иммунную систему и психоэмоциональное
состояние животных .............................
ЦИТОКИНЫ
Горская Ю.Ф., Семенова Е.Н., Грабко В.И., Суслов А.П.,
Нестеренко В.Г. Противовирусный препарат "Кагоцел®"
оказывает модулирующее действие на цитокиновый
профиль сыворотки крови мышей линии СВА,
формирующийся под действием комплекса антигенов
S. typhimurium in vivo .............................
ИММУНООНКОЛОГИЯ
Баратова Д.А., Баратова М.А., Нурлыханов Е.Б. Распространенность
редких форм иммунохимического варианта
иммуноглобулинов у больных множественной миеломой
и доноров гемопоэтических стволовых клеток ....
Гривцова Л.Ю., Глухов Е.В., Чулкова С.В., Безнос О.А.,
Фомина А.В., Неред С.Н., Стилиди И.С., Тупицын
Н.Н. Особенности В-клеточного звена иммунитета у
больных раком желудка после спленэктомии ..........
ИНФЕКЦИОННАЯ ИММУНОЛОГИЯ
Пономарева Т.С., Дерябин П.Н., Каральник Б.В., Тугамбаев
Т.И., Атшабар Б.Б., Денисова Т.Г., Закарян
С.Б., Мельникова Н.Н. Влияние полиоксидония
на иммуногенную и протективную активность живой
чумной вакцины .................................
ОБЗОРЫ
Фалалеева С.А., Курилин В.В., Шкаруба Н.С., Альшевская
А.А., Сенников С.В. Роль субпопуляций дендритных
клеток в патогенезе ревматоидного артрита .....
ЮБИЛЕЙ
Черешнев Валерий Александрович (к 70-летию со дня
рождения)
291
295
– 235 –
276
279
247
CONTENTS
MOLECULAR IMMUNOLOGY AND IMMUNOGENETICS
Danilko K.V., Nazarova L.Sh., Karimov D.O., Tselousova
O.S., Volkova A.T., Kataev V.A., Malievskiy V.A., Viktorova
T.V. Single nucleotide polymorphism -173G>C of
macrophage migration inhibitory factor gene and susceptibility
to juvenile arthritis
236
241
244
CELL IMMUNOLOGY
Malaytsev V.V., Bogdanova I.M. Tumor cells induced activation
of innate immune system in population of splenocytes
intact mice in vitro
Panchenko L. F., Moiseev V.S., Pirozhkov S.V., Terebulina
N.N., Naumova T.A., Baronets V.Yu., Goncharov
A. Characteristics of immune blood cells in patients with
dilated cardiomyopathy : genesis alcohol and non-alcoholic
cardiomyopathy, ischemic type. the comparative role
of inflammation Tx1 should be-, Tx2 and Тх17 classes
251
260
Struchko G.Yu., Moskvichev E.V., Merkulova L.M., Kostrova
O.Yu., Mikhaylova M.N. Morphological and immunohistochemical
phenotype of the thymus after polyoxidonium
introduction
REGULATION OF IMMUNITY
264
268
Krutetskaya I.Yu., Samoylovich M.P., Klimovich V.B.,
Klimovich A.V. Monoclonal antibodies against tammhorsfall
protein: epitope specificity and immunoanalytic
application
Tiurenkov I.N., Gumilevskiy B.Yu., Filina I.S., Samo-trueva
M.A., Bakulin D.A. Influence of beta-phenylglutamic
acid hydrochloride (RGPU-135, neuroglutam) on immune
system and psychoemotional state of animals
CYTOKINES
Gorskaya Yu.F., Semyonova E. N., Grabco V.I., Suslov A.P.,
Nesterenko V.G. Antivirus preparation kagocel® exerts
modulating multidirectional influence on blood serum cytokines
profile forming by S. typhimurium antigen complex
injection in CbA mice
272
IMMUNOONCOLOGY
Baratova D.A., Baratova M.A., Nurlyhanov E.B. Prevalence
of rare forms of immunochemical option immunoglobulins
in multiple myeloma patients and donors of hematopoietic
stem cells
Grivtsova L.Yu., Glukhov E.V., Chulkova S.V., Beznos O.A.,
Fomina A.V., Nered S.N., Stilidy I.S., Tupitsyn N.N. Role
of splenectomy in peculiarities of peripheral blood b-cell subpopulations
in patients with gastric cancer
INFECTIOUS IMMUNOLOGY
Ponomareva T.S., Deryabin p.N., Karalnik B.V., Tugambaev
T.I., Atshabar B.B., Denisova T.G., Zakaryan
S.B., Mel’nikova N.N. The impact of polyoxidonium on
immunogenic and protective activity alive plague vaccine
286
REVIEWS
Falaleeva S.A., Kurilin V.V., Shkaruba N.S., Alshevskaya
A.A., Sennikov S.V. Role subpopulation of dendritic
cells in the pathogenesis of rheumatoid arthritis
JUBILEE
Chereshnev Valeriy Aleksandrovich (to the 70th anniversary
of birthday)
© ОАО «Издательство "Медицина"» 2014
Sentsova T.B., Kirillova O.O., Tutel’yan V.A., Vorozhko
I.V., Revyakina V.A., Gapparova K.M. Genetic markers
of metabolism in evaluation of cytokine status in obese
patients
Baratova D.A., Dzhaparkulova A.D., Nurlyhanov Е.В., Baratova
М.А. Immunogenetic characteristics I and class II
HLA-alleles major histocompatibility complex among potential
donors of hematopoietic stem cells
Стр.3
иММуНоЛогия № 5, 2014
МОЛеКУЛяРНая ИММУНОЛОгИя И ИММУНОгеНеТИКа
© КОллеКтИв АвтОРОв, 2014
УдК 616.72-002-053.5-092:612.6.05.017.1]-07
Данилко К.В.1
Малиевский В.А.1
, Назарова Л.Ш.1
, Каримов Д.о.1
, Викторова Т.В.1, 2
ОднОнУКлеОтИднАЯ зАМенА -173G>C ГенА ФАКтОРА ИнГИБИРОвАнИЯ
МИГРАцИИ МАКРОФАГОв И ПРедРАсПОлОЖеннОсть К РАзвИтИЮ
ЮвенИльнЫХ АРтРИтОв
1
, Целоусова о.С.1
, Волкова А.Т.1
, Катаев В.А.,
гБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, 450000, г. Уфа;
2ФгБУН РаН Институт биохимии и генетики УНЦ РаН, 450054, г. Уфа, Российская Федерация
Методом полимеразно-цепной реакции в реальном времени изучен однонуклеотидный полиморфизм -173G>C
(rs755622) гена фактора ингибирования миграции макрофагов (MIF) у детей с ювенильными артритами (Юа) и
здоровых лиц, жителей Республики Башкортостан. Показано, что генетическими маркерами повышенного риска
развития Юа являются генотип GG (p = 0,02; OR = 1,74; CI 1,12–2,72) и аллель G (p = 0,03; OR = 1,55; CI 1,06–2,28).
генотип GG маркирует также более ранний (до 6 лет) возраст дебюта Юа (p = 0,003). III степень активности Юа
ассоциирована с наличием у пациента генотипов GC или СС (p = 0,04). Таким образом, в нашей работе выявлена
ассоциация полиморфного локуса MIF*-173G>C с формированием Юа и клинических вариантов течения заболевания.
Ключевые
слова: полиморфизм -173G>C гена MIF; фактор ингибирования миграции макрофагов; ювенильный
артрит; предрасположенность; ассоциация.
Danilko K.V.1
, Nazarova L.Sh.1
, Karimov D.O.1
, Tselousova O.S.1
, Volkova A.T.1
, Kataev V.A.1
, Malievskiy V.A.1
, Viktorova T.V.1, 2
SINGlE NUClEOtIDE POlyMOrPhISM -173G>C OF MACrOPhAGE MIGrAtION INhIBItOry FACtOr
GENE AND SUSCEPtIBIlIty tO jUvENIlE ArthrItIS
Bashkortostan State Medical university, 450000, ufa; Institute of Biochemistry and Genetics, 450054, ufa, Russian Federation
the -173G>C (rs755622) SNP of the macrophage migration inhibitory (MIF) gene was studied in children with juvenile
arthritis (jA) and healthy individuals, citizens of the Bashkortostan, using real time PCr. It was shown, that the genetic
markers of increased jA risk were the genotype GG (p = 0,02; Or = 1,74; CI (1,12–2,72)) and allele G (p=0,03; Or =
1,55; CI (1,06–2,28)). GG genotype also mark the earlier age debut of jA (0–6 years) (p = 0,003). III stage of jA activity
associated with the presence in patients GC or CC genotype (p = 0,04). thus, our research revealed the association of
the polymorphic locus MIF*-173G>C with the jA formation and clinical variants of the disease.
keywords: MIF*-173G>C polymorphism; macrophage migration inhibitory factor; juvenile arthritis; predisposition;
association.
введение. Согласно современным представлениям, ювенильные
артриты (ЮА) являются неоднородной группой заболеваний
иммуногенетического происхождения, включающей
различные нозологические формы, которые проявляются
в возрасте до 16 лет. Для ЮА характерны сложный этиопатогенез,
вариабельность течения заболевания, неоднозначный
прогноз и исход патологического процесса. По данным
В.А. Малиевского, первичная заболеваемость ЮА на территории
Республики Башкортостан составляет 17,2, распространенность
– 83,8 на 100 000 детей до 16 лет [1].
Как показали результаты исследований многих авторов,
развитие ЮА обусловлено взаимодействием генетических и
средовых факторов. Так, наследственная предрасположенность
к этому заболеванию подтверждается результатами
близнецовых исследований, семейным анализом сцепления,
данными иммуногенетического и полногеномного анализа
[2, 3]. Наиболее часто в качестве маркеров риска развития
ЮА рассматривают антигены главного комплекса гистосовДля
корреспонденции: Данилко Ксения владимировна,
e-mail: kse-danilko@yandex.ru
For correspondence: Danilko Kseniya Vladimirovna, e-mail:
kse-danilko@yandex.ru
местимости (локусы hlA-A, hlA-B, hlA-DR) [2]. Однако
доля их участия в формировании наследственной предрасположенности
к ЮА не превышает 18% [2], что говорит о существовании
иных генетических вариантов, ответственных
за развитие ЮА.
Известно, что в основе артрита у детей лежит активация
клеточного и гуморального звеньев иммунитета, возможно,
в ответ на чужеродные или измененные собственные антигены.
В результате сложных взаимодействий активированные
Т-лимфоциты, макрофаги, фибробласты, синовиоциты вырабатывают
провоспалительные цитокины, такие как фактор
некроза опухолей α (tnFα), интерлейкин (Il)-1, Il-6, фактор
ингибирования миграции макрофагов (macrophage migration
inhibitory factor, MIF; MIM 153620), вызывающие каскад
патологических изменений с развитием прогрессирующего
воспаления в полости сустава. Неконтролируемые реакции
иммунной системы приводят к развитию хронического воспаления,
необратимых изменений в суставах и экстраартикулярных
проявлений [4, 5].
Одним из самых древних провоспалительных цитокинов
животных является MIF. Для MIF характерно присутствие
практически во всех органах и тканях организма (в том числе в
синовиоцитах и фибробластах), исключительно широкое разнообразие
функций (провоспалительный цитокин, фермент,
– 236 –
Стр.4
иММуНоЛогия № 5, 2014
гормон), способность индуцироваться глюкокортикоидами и
оказывать контррегулирующее действие на их иммуносупрессивные
эффекты [6, 7]. В преформированном состоянии MIF
выделяется лимфоцитами, макрофагами и клетками эндотелия,
но его уровень значительно повышается уже в первые минуты
чужеродного воздействия. MIF вовлечен в механизм самой
ранней стресс-мобилизации организма, что обеспечивает
выход моноцитов и макрофагов из циркуляции, их накопление
в очаге воспаления, активацию макрофагов и Т-лимфоцитов и
запуск продукции других провоспалительных цитокинов, таких
как tnFα, интерферон-γ, Il-1β, Il-8 [8]. Предполагается,
что MIF может функционировать как ключевой фактор естественной
устойчивости клетки и организма. Еще одной функцией
MIF является индукция продукции металлопротеиназ 9 и
13, играющих важную роль в процессах деструкции суставного
хряща при ЮА и формировании паннуса [8].
В исследованиях разных авторов показано участие MIF в
развитии таких заболеваний, как идиопатический ЮА (ЮИА)
[9] и ревматоидный артрит (РА) [7, 10]. Согласно данным ряда
исследований, уровень MIF повышен в сыворотке и синовиальной
жидкости у пациентов с активным течением олигоартритического,
полиартритического и системного вариантов
ЮА, его максимальный уровень выявляют при системном
варианте [9, 11]. Кроме того, повышение содержания MIF в
сыворотке крови коррелирует с тяжестью течения системного
ЮА, а также с высоким уровнем СОЭ, С-реактивного белка,
ревматоидного фактора (РФ), АЦЦП и более значительным
поражением суставов при (РА) [9, 12, 13].
Важная роль MIF в развитии артрита показана также на
животных моделях. В частности, установлено, что лечение
мышей с помощью анти-MIF-антител в одних случаях подавляет
развитие заболевания, в других отодвигает сроки манифестации,
снижает частоту и активность индуцированного
артрита, а применение ДНК-вакцины ведет к значительному
облегчению симптомов заболевания [14, 15].
Кроме того, у пациентов с олигоартритом, полиартритом
и системным вариантом ЮА не обнаружено взаимосвязи
между уровнем MIF в сыворотке крови и эффективностью
системной терапии метотрексатом и глюкокортикостероидами
[9]. В то же время, по данным M. llamas-covarrubias и соавт.,
уровень MIF у пациентов из Мексики находится в обратной
зависимости от давности развития РА, но не ассоциирует
с активностью заболевания [12]. Вышеприведенные данные
указывают на важную роль MIF в патогенезе ЮА.
Ген MIF расположен на длинном плече хромосомы 22
(локус 22q11.2). Одним из наиболее изученных однонуклеотидных
полиморфизмов гена является замена в промоторной
области (-173G>c, rs755622) [16]. В исследовании R. Donn и
соавт. выявлена ассоциация аллеля MIF*-173c с развитием
ЮИА, а также показано, что данный генетический вариант
связан со снижением уровня экспрессии белка в культуре
эпителиальных клеток и, напротив, с повышением в культуре
Т-лимфобластов и сыворотке крови у здоровых лиц [17]. В то
же время в работе B. Miterski и соавт. не продемонстрировано
различий в частоте аллеля С у здоровых лиц и больных
ЮА, а у пациентов с РА его частота оказалась значительно
ниже, чем в контрольной группе [18].
Цель нашего исследования заключалась в выяснении
роли полиморфного варианта -173G>c (rs755622) гена MIF в
развитии ЮА у жителей Республики Башкортостан.
Материал и методы. Для выявления ассоциации полиморфизма
-173G>c гена MIF с развитием ЮА провели
исследование типа случай – контроль. Сравнили частоту
генотипов и аллелей локуса MIF*-173G>c у больных ЮА
и у здоровых лиц (контроль), жителей Республики Башкортостан.
Анализ результатов проводили с учетом полового
состава и этнической структуры больных и здоровых лиц, а
также с учетом клинических форм ЮА по IlAR (International
league of Associations for Rheumatology), активности заболевания,
рентгенологической стадии, функционального класса,
возраста дебюта заболевания и ответа на лечение метотрексатом
у пациентов с ЮА.
Образцы крови 155 пациентов с ЮА получены в Республиканской
детской клинической больнице Уфы в 2011–2013
гг. после информированного письменного согласия родителей
– участников исследования. Средний возраст больных
ЮА (53 мальчика и 102 девочки) составил 9,32±0,35 года.
Клиническое обследование, постановку диагноза и распределение
пациентов в зависимости от типа артрита в соответствии
с критериями IlAR провели врачи отделения кардиоревматологии.
Образцы
крови 208 здоровых лиц получены от добровольцев,
отрицающих наличие в анамнезе ЮА и иных аутоиммунных
или аллергических заболеваний, после подписания
ими информированного согласия. Средний возраст здоровых
лиц (80 мальчиков и 128 девочек) составил 18,23±0,07 года.
Данное распределение по половому составу было статистически
неотличимо от такового среди пациентов с ЮА (χ2
=
0,525; p = 0,469).
Геномную ДНК выделяли стандартным методом последовательной
фенол-хлороформной экстракции из лейкоцитов
свежей или замороженной консервированной крови. Генотипирование
полученных образцов ДНК по изучаемому локусу
проводили методом полимеразно-цепной реакции в режиме
реального времени c использованием праймеров и зондов,
разработанных фирмой «ДНК-Синтез», Россия.
Оценку соответствия распределения частоты генотипов
равновесию Харди–Вайнберга (hwe) (χ2
), анализ ассоциации
с использованием расчета показателя отношения шансов
(OR) для каждого анализируемого фактора, оценку статистической
значимости различий между группами по частоте аллелей
и генотипов (χ2
с поправкой Йетса либо точный двухсторонний
критерий Фишера при суммарном количестве лиц
в группе менее 100) проводили в программах Microsoft excel,
Statistica v. 6.0, BioStat версия 4.03, а также SnPStats [19].
результаты. Среди больных ЮА и здоровых лиц провели
проверку распределения частоты генотипов полиморфного
локуса MIF*-173G>c на соответствие hwe. Отклонения
не обнаружились (табл. 1).
При сравнении частоты генотипов и аллелей у больных
ЮА и здоровых лиц выявили статистически значимую ассоциацию
локуса MIF*-173G>c с возникновением ЮА (см.
табл. 1). Показано, что генетическими маркерами повышенного
риска развития ЮА являются генотип GG (OR = 1,74) и
аллель G (OR = 1,55). Снижение частоты генотипа Gc (59,1%
у больных ЮА и 71,6% у здоровых лиц; OR = 0,58) и аллеля
С (14,5% против 22,1% соответственно; OR = 0,65), напротив,
указывает на протективное значение данных генетических
вариантов. Результаты статистического анализа в программе
SnPStats продемонстрировали, что наиболее удачной
моделью наследования является доминантная: GG против
Gc+cc (p = 0,014; OR = 0,57; cI 0,37–0,90).
Таблица 1
Частота генотипов и аллелей полиморфизма MiF*-173G>c у
больных Юа и здоровых лиц
Генотип
MIF
GG
Gc
CC
Аллель
MIF
G
C
HWE
(p)
– 237 –
324 (77,9) 262 (84,5)
92 (22,1) 48 (14,5)
0,23
0,76
Пр и м е ч а н и е . Здесь и в табл. 2–4: в скобках указан процент; * –
статистически достоверные различия.
1,55 (1,06–2,28)
0,65 (0,44–0,95)
4,60 0,032*
4,60 0,032*
Здоровые
лица
ЮА
123 (59,1) 111 (71,6)
78 (37,5) 40 (25,8)
7 (3,4)
4 (2,6)
OR (95% cI)
1,74 (1,12–2,72)
0,58 (0,37–0,92)
0,76 (0,22–2,65)
χ2
p
5,50 0,019*
5,02 0,025*
0,01 0,903
Стр.5