П.Г. Демидова
Кафедра физиологии человека и животных
Биотестирование
Биологические методы определения
токсичности водной среды
Методические указания
Рекомендовано
Научно-методическим советом университета
для студентов специальности Экология
и направления Экология и природопользование
Ярославль 2006
1
УДК 615.9 : 574
ББК Е 081я73
Б 63
Рекомендовано
Редакционно-издательским советом университета
в качестве учебного издания. <...> Биологические методы определения токсичности водной среды : метод. указания / Сост. <...> Метод определения токсичности
водной среды по смертности и изменению
плодовитости цериодафний <...> Назначение и область применения методики
Биотестирование проводят для определения острой и хронической токсичности питьевых, грунтовых, поверхностных, сточных
вод, воды в контрольном и других створах водопользования с целью проверки соответствия качества воды нормативным требованиям (сточная вода на сбросе не должна оказывать острого токсического действия, а вода в контрольном и других створах водопользования – хронического токсического действия на тестобъекты («Правила охраны поверхностных вод», 1991 г., п. <...> 5.7), а
также водных вытяжек из почв, осадков сточных вод и отходов в
лабораторных условиях с использованием в качестве тест-обьекта
низших ракообразных – цериодафний. <...> Результаты биотестирования учитывают при установлении величин предельно допустимых сбросов (ПДС) загрязняющих веществ в водные объекты. <...> Принцип методики
Методика основана на определении смертности и изменений в
плодовитости цериодафний (Ceriodaphnia affinis, Cladocera, Crustacea) при воздействии токсических веществ, присутствующих в
исследуемой водной среде, по сравнению с контрольной культурой
в пробах, не содержащих токсических веществ (контроль). <...> 3
Острые опыты проводятся в краткосрочном эксперименте
для предварительной оценки степени токсичности и выявления
остротоксичной концентрации вещества или кратности разбавления сточных <...>
Биотестирование_.pdf
Министерство образования и науки Российской Федерации
Федеральное агентство по образованию
Ярославский государственный университет им. П.Г. Демидова
Кафедра физиологии человека и животных
Биотестирование
Биологические методы определения
токсичности водной среды
Методические указания
Рекомендовано
Научно-методическим советом университета
для студентов специальности Экология
и направления Экология и природопользование
Ярославль 2006
1
Стр.1
УДК 615.9 : 574
ББК Е 081я73
Б 63
Рекомендовано
Редакционно-издательским советом университета
в качестве учебного издания. План 2006 года
Рецензент
кафедра физиологии человека и животных
Ярославского государственного университета им. П.Г. Демидова
Составители : канд. биол. наук, доцент Е.В. Рябухина,
ст. науч. сотр. С.Л. Зарубин
Биотестирование. Биологические методы определения токсичБ
63
ности водной среды : метод. указания / Сост. Е.В. Рябухина,
С.Л. Зарубин ; Яросл. гос. ун-т. – Ярославль : ЯрГУ, 2006. – 64 с.
Преназначено для студентов факультета биологии и экологии,
обучающихся по специальости 013100 Экология, направлению
511100 Экология и природопользование (дисциплина «Биотестирование»,
блок СД), очной формы обучения.
Ил. 5. Табл. 16.
УДК 615.9 : 574
ББК Е 081я73
© Ярославский государственный университет, 2006
© Е.В. Рябухина, С.Л. Зарубин, 2006
2
Стр.2
Содержание
Тема 1. Токсикологический контроль качества водной среды
методами биотестирования ....................................................... 3
1.1. Метод определения токсичности водной среды
по смертности и изменению плодовитости
цериодафний ........................................................................ 3
1.2. Назначение и область применения методики ..................... 3
1.3. Принцип методики ................................................................. 3
1.4. Характеристика тест-объекта ............................................... 5
1.5. Условия проведения биотестирования ................................ 7
1.6. Подготовка к проведению биотестирования ....................... 7
1.6.1. Подготовка посуды для отбора, хранения проб
и биотестирования .................................................................. 8
1.6.2. Подготовка культивационной воды ................................... 8
1.6.3. Получение исходного материала, транспортировка,
содержание и кормление цериодафний, выращивание
культуры .................................................................................... 9
1.6.4. Подготовка кopма и кормление ......................................... 12
1.6.5. Отбор, транспортировка, хранение и подготовка
проб воды ................................................................................. 17
1.7. Процедура биотестирования ............................................... 22
1.7.1. Эксперименты по установлению острого
токсического действия .......................................................... 22
1.7.2. Эксперименты по установлению хронического
токсического действия .......................................................... 24
1.8. Обработка, оценка и оформление результатов ................. 27
1.8.1. Острые токсикологические эксперименты ..................... 27
1.8.2. Хронические токсикологические эксперименты ............. 30
1.9. Контроль погрешности методики токсикологического
анализа ................................................................................ 33
1.9.1. Контроль качества оценки токсичности воды ............... 33
1.9.2. Процедура определения диапазона реагирования
тест-организмов на модельный токсикант........................ 33
1.10. Форма представления результата анализа ....................... 34
62
Стр.62
Тема 2. Экспериментальная оценка изменения качества среды
в процессе самоочищения модельных водоемов
от токсических веществ ........................................................... 35
2.1. Биотестирование модельного раствора токсиканта
с использованием цериодафний ....................................... 38
2.1.1. Выявление летальных концентраций исследуемого
вещества в остром опыте по показателю
выживаемости Ceriodaphnia ................................................ 39
2.2. Выявление роли факторов среды в ПРОЦЕССАХ
самоочищения модельных водоемов (микрокосмов)
от токсических веществ методами биотестирования ..... 44
2.2.1. Выявление роли абиотических и биотических
факторов в процессах детоксикации химических
веществ в модельном эксперименте .................................... 44
2.2.2. Анализ полученных результатов ....................................... 49
Литература ............................................................................................. 50
Приложения ........................................................................................... 51
63
Стр.63