213–218 УДК 582.21.05 СИНТЕЗ L-ЛАКТАТОКСИДАЗЫ ДРОЖЖАМИ Yarrowia lipolytica В УСЛОВИЯХ ГЛУБИННОГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ © 2017 г. Е. Н. Бирюкова, А. Ю. Аринбасарова, А. Г. Меденцев Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. <...> Г.К. Скрябина РАН, Пущино, 142290 e-mail: biryukovae05@rambler.ru Поступила в редакцию 22.07.2016 г. Изучен биосинтез L-лактатоксидазы дрожжами Yarrowia lipolytica в условиях глубинного культивирования в лабораторных биореакторах АНКУМ-2М. <...> Показано, что при оптимальном режиме выращивания дрожжей на L-лактате в среде накапливалось 24.5 Е/л фермента, продуктивность составляла 2.0 Е/(л Ч ч). <...> Увеличение биосинтеза L-лактатоксидазы до 75 Е/л и продуктивности до 3.2 Е/(л Ч ч) достигалось на среде с L-лактатом (1%) и глюкозой (2%). <...> Фермент очищен в 251 раз с использованием гидрофобной и ионообменной хроматографии до гомогенного состояния c выходом 45% и удельной активностью 55.3 Е/мг. <...> Методами гельфильтрации и денатурирующего электрофореза показано, что L-лактатоксидаза из Y. lipolytica является тетрамером с молекулярной массой 200–230 кДа. <...> Фермент проявлял строгую специфичность к L-лактату и не окислял фумарат, пируват, сукцинат, аскорбат, дигидроксиацетон, гликолат, D-лактат, D, L-2-гидроксибутират, а также D, L-аланин или D-серин. <...> Ключевые слова: L-лактатоксидаза, дрожжи Yarrowia lipolytica, глубинное культивирование DOI: 10.7868/S0555109917020064 L-лактатоксидаза (КФ 1.1.3.15) – флавиновый фермент, катализирующий окисление L-лактата до пирувата с восстановлением кислорода до перекиси водорода. <...> В медицинской практике фермент используется для определения содержания L-лактата в крови и других физиологических жидкостях человека при различных патологических состояниях. <...> Лактатоксидаза обнаружена у бактерий Aerococcus viridans [1], Mycobacterium phlei [2], Pediococcus sp. <...> [3], Lactococus lactis [4], Mycobacterium smegmatis [5], а также у гриба Geotrichum candidum [6, 7] <...> . Ранее было показано [8], что дрожжи Yarrowia lipolytica также синтезируют лактатоксидазу при выращивании на L-лактате в качестве единственного источника углерода и энергии. <...> Так, ферменты, выделенные <...>