309 – 322 УДК 577.35 СУБСТРАТСПЕЦИФИЧНОЕ ВОССТАНОВЛЕНИЕ СОЛЕЙ ТЕТРАЗОЛИЯ В ИЗОЛИРОВАННЫХ МИТОХОНДРИЯХ, ТКАНЯХ И ЛЕЙКОЦИТАХ © 2017 Н. <...> В.А. Неговского, 107031 Москва, Россия Поступила в редакцию 20.05.16 После доработки 08.08.16 Соли тетразолия широко применяются в цитохимических и биохимических исследованиях как индикаторы метаболической активности клеток. <...> В данной работе исследовали критерии и условия для измерения окисли тельной активности митохондрий и активности дегидрогеназ по восстановлению нитросинего тетразолия (НСТ) и метилтиазолилтетразолия (МТТ) в суспензиях изолированных митохондрий, гомогенатов тканей и лейкоцитов. <...> Показано, что восстановление этих акцепторов зависит от субстрата окисления, НСТ активнее восстанавливался при окислении сукцината, МТТ – при окислении NADзависимых субстратов. <...> Восста новление обоих акцепторов более чувствительно к ингибиторам дегидрогеназ, чем к ингибиторам дыха тельной цепи. <...> При окислении сукцината восстановление НСТ в изолированных митохондриях, лейкоцитах в присутствии дигитонина и в гомогенатах печени и почки полностью блокировалось ингибиторами сукци натдегидрогеназы – малонатом и ТТФА. <...> Согласно этим критериям, выявлена активация окисления сукци ната по увеличению малонатчувствительной фракции восстановленного НСТ при физиологическом стрессе. <...> С помощью МТТ исследовано влияние прогестерона и его синтетических аналогов на окисление NADзависимых субстратов в митохондриях. <...> Оба акцептора восстанавливаются также супероксид анио ном, вклад этой реакции несущественен или отсутствует при физиологических условиях, но может прояв ляться при генерации супероксида, индуцированной ингибиторами отдельных ферментных комплексов или при дисфункции митохондрий. <...> Полученные результаты показывают, что измерение оптической плот ности восстановленных НСТ и МТТ является высокочувствительным методом оценки метаболической ак тивности <...>