С использованием скринингового подхода на основе этого метода сконструирован искусственный вариант гена белка ns5А вируса гепатита С (вгС), обладающий оптимальными биотехнологическими характеристиками. в работе использованы 27 образцов ns5А вгС длиной 1670 п. н. <...> Клоны протестированы на уровень β-галактозидазной активности и иммуногенные свойства. в результате отобран клон, продуцирующий растворимый белок массой около 114 кДа, накапливающийся с выходом до 0,3% от общего содержания белка в клетке и показавший положительную реакцию с антителами сыворотки крови больных, инфицированных вгС генотипа 1b, но не с сыворотками здоровых доноров. <...> Разработка нового метода получения белка-антигена NS5A вируса гепатита С. <...> DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0507-4088-2017-62-1-17-25 Kuznetsova T.V.1,2 , Smirnova M.S.1 , Leonovich O.A.1 Tyn’o Ya.Ya.1 , Gordeichuk I.V.1 , Belyakova A.V.1 , Biriukova Iu.K.1 , Shevelev A.B.1 a neW MeThOd OF PrOdUcing ns5a anTigen OF hePaTiTis c VirUs 1 Chumakov institute of Poliomyelitis and Viral Encephalitides, Moscow,142782, Russian Federation; 2 National institute of Public Health Development, Tallinn, 11619, Estonia A task of creating a universal platform for engineering affordable recombinant producers of viral proteins conserving immunogenicity has not been solved yet. <...> Образцы перечисленных фрагментов кДНК были подвергнуты вторичной ПЦР-амплификации с целью накопления ДНК целевого гена NS5A—NS5B, объединены в пул и очищены с помощью набора Silica bead DNA gel extraction kit («Thermo Fisher Scientific») согласно протоколу производителя. <...> Полученную смесь делили на 4 аликвоты объемом 20 мкл каждая. <...> В первую пробирку вносили ДНКазу («Thermo Fisher Scientific») с активностью 1•10–4 количестве 10 мкг разбавляли в объеме 80 мкл в буфере 10 мМ трис-HCl, pH 7,5, 1 мМ MgCl2 , 50 мМ NaCl, 1 мМ ед/мкл, тщательно перемешивали, и аликвоту полученного раствора <...>