2016.4.450rus ВЫДЕЛЕНИЕ, КУЛЬТИВИРОВАНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА СПЕРМАТОГОНИЕВ ПЕТУХА (Gallus gallus) Н.А. ВОЛКОВА, С.В. КОРЖИКОВА, Т.О. КОТОВА, А.Н. ВЕТОХ, Л.А. ВОЛКОВА, Н.А. ЗИНОВЬЕВА Использование клеток гонад самцов сельскохозяйственных животных и птицы для получения химерных и генетически модифицированных особей рассматривается как альтернатива традиционным методам селекции и модификации генома и открывает широкие возможности для получения особей с новыми заданными свойствами. <...> В случае трансгенеза такой подход предусматривает целенаправленную генетическую модификацию половых клеток самцов при инъекции рекомбинантной ДНК непосредственно в паренхиму семенников взрослых особей (in vivo) или введении трансформированных донорских сперматогониев в семенники стерильных особей-реципиентов (ex vivo) и получении в дальнейшем потомства. <...> В последнем случае ключевые факторы, определяющие эффективность проводимых манипуляций, — получение чистой популяции донорских клеток и элиминация собственных сперматогенных клеток (выключение сперматогенеза). <...> В этой связи остается актуальной разработка эффективных методов выделения и поддержания в культуре стволовых клеток семенников — сперматогониев. <...> Целью наших исследований была оптимизация методических подходов для выделения и культивирования сперматогониев петуха как одного из этапов технологии создания трансгенной птицы. <...> На основании данных гистологических исследований сперматогенеза у петухов было установлено, что в возрасте до 5 нед сперматогенные клетки представлены преимущественно одним типом клеток — сперматогониями. <...> В связи с этим для получения культуры сперматогониев использовали семенники 2-недельных особей. <...> Выделение сперматогенных клеток из тестикул петуха осуществляли посредством последовательной механической и ферментативной обработок ткани семенника. <...> Для ферментативной диссоциации ткани семенника последовательно обрабатывали раствором <...>