Национальный цифровой ресурс Руконт - межотраслевая электронная библиотека (ЭБС) на базе технологии Контекстум (всего произведений: 635043)
Контекстум
Руконтекст антиплагиат система
Сельскохозяйственная биология  / №6 2014

ОБ ИСПОЛЬЗОВАНИИ СЕРОЛОГИЧЕСКИХ И МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ПРИ ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННОЙ АНЕМИИ ЛОШАДЕЙ (130,00 руб.)

0   0
Первый авторГерасимова
АвторыКолбасова O.Л., Цыбанов С.Ж., Луницин А.В., Колбасов Д.В.
Страниц5
ID410360
АннотацияИнфекционная анемия лошадей (ИНАН) — вирусная болезнь однокопытных, вызываемая РНК-содержащим вирусом из рода Lentivirus семейства Retroviridae. Она сопровождается поражением органов кроветворения и проявляется рецидивирующей или постоянной лихорадкой, анемией и нарушением функций сердечно-сосудистой системы. Своевременная диагностика ИНАН — единственный надежный способ контроля заболевания. Для этой цели предложены различные серологические и молекулярно-генетические методы. Серологические методы исследования при ИНАН имеют определенные недостатки. С их помощью невозможно выявить больных животных до начала сероконверсии, кроме того, зарегистрированы случаи иммунодефицитного состояния лошадей, при котором вирусспецифические антитела образуются в количестве, недостаточном для их обнаружения. В настоящей работе представлены данные по сравнительной оценке различных серологических и молекулярно-генетических методов диагностики инфекционной анемии лошадей при экспериментальном воспроизведении инфекции у восприимчивого животного. Использовали соответственно реакцию диффузионной преципитации (РДП), иммуноферментный анализ (ИФА) и способы обнаружения фрагментов генома вируса ИНАН с помощью гнездовой ПЦР с этапом обратной транскрипции (ОТ-ПЦР) и электрофоретической детекцией, а также ОТ-ПЦР в режиме реального времени. Разработанные тест-системы для ПЦРдиагностики основаны на амплификации фрагментов gag-гена вируса ИНАН с использованием специфических олигонуклеотидных праймеров. При исследовании проб крови, взятой на 2-е сут после экспериментального заражения, получен положительный ответ в гнездовой ОТ-ПЦР с электорофоретической детекцией и в ОТ-ПЦР в режиме реального времени. Далее геном вируса ИНАН выявлялся методом ОТ-ПЦР до конца срока наблюдения, составлявшего 35 сут. Специфические антитела в сыворотке крови обнаруживали методом РДП, начиная с 30-х, ИФА — с 21-х сут после инфицирования. Таким образом, ПЦР можно эффективно применять в качестве специфичного экспресс-метода для выявления генома вируса ИНАН в период до начала сероконверсии с последующей верификацией другими лабораторно-диагностическими методами. Для предлагаемых отечественных тест-систем и рекомендованных методик исследования подтверждены преимущества использования ПЦР-диагностики на ранних сроках заболевания ИНАН.
УДК636.1:619:616.155.194:577.2:57.083
ОБ ИСПОЛЬЗОВАНИИ СЕРОЛОГИЧЕСКИХ И МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ПРИ ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННОЙ АНЕМИИ ЛОШАДЕЙ / Н.Н. Герасимова [и др.] // Сельскохозяйственная биология .— 2014 .— №6 .— С. 82-86 .— URL: https://rucont.ru/efd/410360 (дата обращения: 04.05.2024)

Предпросмотр (выдержки из произведения)

81-85 УДК 636.1:619:616.155.194:577.2:57.083 ОБ ИСПОЛЬЗОВАНИИ СЕРОЛОГИЧЕСКИХ И МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ПРИ ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННОЙ АНЕМИИ ЛОШАДЕЙ Н.Н. <...> КОЛБАСОВА, С.Ж. ЦЫБАНОВ, А.В. ЛУНИЦИН, Д.В. КОЛБАСОВ Инфекционная анемия лошадей (ИНАН) — вирусная болезнь однокопытных, вызываемая РНК-содержащим вирусом из рода Lentivirus семейства Retroviridae. <...> Она сопровождается поражением органов кроветворения и проявляется рецидивирующей или постоянной лихорадкой, анемией и нарушением функций сердечно-сосудистой системы. <...> Своевременная диагностика ИНАН — единственный надежный способ контроля заболевания. <...> Серологические методы исследования при ИНАН имеют определенные недостатки. <...> С их помощью невозможно выявить больных животных до начала сероконверсии, кроме того, зарегистрированы случаи иммунодефицитного состояния лошадей, при котором вирусспецифические антитела образуются в количестве, недостаточном для их обнаружения. <...> В настоящей работе представлены данные по сравнительной оценке различных серологических и молекулярно-генетических методов диагностики инфекционной анемии лошадей при экспериментальном воспроизведении инфекции у восприимчивого животного. <...> Использовали соответственно реакцию диффузионной преципитации (РДП), иммуноферментный анализ (ИФА) и способы обнаружения фрагментов генома вируса ИНАН с помощью гнездовой ПЦР с этапом обратной транскрипции (ОТ-ПЦР) и электрофоретической детекцией, а также ОТ-ПЦР в режиме реального времени. <...> Разработанные тест-системы для ПЦРдиагностики основаны на амплификации фрагментов gag-гена вируса ИНАН с использованием специфических олигонуклеотидных праймеров. <...> При исследовании проб крови, взятой на 2-е сут после экспериментального заражения, получен положительный ответ в гнездовой ОТ-ПЦР с электорофоретической детекцией и в ОТ-ПЦР в режиме реального времени. <...> Далее геном вируса ИНАН выявлялся методом ОТ-ПЦР до конца срока наблюдения, составлявшего 35 сут. <...>