ЭКСПРЕССИЯ РЕПОРТНОГО ГЕНА LACZ - ПОКАЗАТЕЛЬ АКТИВАЦИИ ЭМБРИОНАЛЬНОГО ГЕНОМА КРОЛИКОВ Козикова Л.В. <...> Репортерные гены находят широкое применение во многих областях науки и практики, например, для повышения, эффективности трансгенеза, уменьшения стоимости трансгенных животных, а также в репродуктивной биологии. <...> Для идентификации и селекции трансгенных эмбрионов кроликов, а также для выявления инициации экспрессии репортерных генов в эмбриональном геноме в настоящем исследовании были использован репортерный ген LacZ с двумя различными промоторами. <...> Микроинъекцию генных конструкций рCMV-LacZ и pSV-40-LacZ проводили на микроманипуляторе при помощи инвертированного микроскопа “Olympus”. <...> Эти конструкции содержали последовательности гена LacZ, под контролем промотора цитомегаловируса (CMV) или под контролем промотора SV-40. <...> Эмбрионы культивировали в питательной среде Менезо В2, с добавлением 10%-й фетальной сыворотки на протяжении 96 часов в стандартных условиях. <...> Наличие экспрессии гена LacZ эмбрионах определяли гистохимически при помощи окраски X-Gal. <...> В первой серии экспериментов после введения генетической конструкция рCMV-LacZ в пронуклеусы зигот эффективность трансгенеза с экспрессией В-галактозидазы составляла 10,3%. <...> Инициацию экспрессии наблюдали через 24 часа культивирования у 4-бластомерного эмбриона. <...> В менее чем половине трансгенных эмбрионов, наблюдали мозаицизм экспрессии репортерного гена. <...> Во второй серии экспериментов после микроинъекции конструкции pSV-40-LacZ в ранние эмбрионы, их культивировании и проведения гистохимического анализа на наличие В-галактозидазы было показано, эффективность трансгенеза составила 9,5%. <...> Через 24 часа у 4-бластомерного эмбриона была выявлена инициация экспрессии гена LacZ. <...> Таким образом, эффективность трансгенеза незначительно изменилась при использовании двух разных гетерологичных промоторов. <...> ВВЕДЕНИЕ Трансгенные эмбрионы с репортерными генами находят широкое применение <...>