Национальный цифровой ресурс Руконт - межотраслевая электронная библиотека (ЭБС) на базе технологии Контекстум (всего произведений: 634794)
Контекстум
Руконтекст антиплагиат система
Вестник Московского университета. Серия 2. Химия  / №2 2016

КЛОНИРОВАНИЕ, ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА МЕТАЛЛО-β-ЛАКТАМАЗЫ NDM-1 И ИЗУЧЕНИЕ КАТАЛИТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ РЕКОМБИНАНТНОГО ФЕРМЕНТА (60,00 руб.)

0   0
Первый авторГригоренко
АвторыРубцова М.Ю., Филатова Е.В., Андреева И.П., Мистрюкова Е.А., Егоров А.М.
Страниц7
ID367343
АннотацияСоздана система экспрессии гена бета-лактамазы NDM-1 в клетках E. coli, обеспечивающая синтез рекомбинантного белка в растворимой активной форме. Разработан метод выделения и очистки рекомбинантного фермента. Выход гомогенного препарата белка составил 10–15 мг с 1 л культуры клеток. Определены каталитические параметры рекомбинантной бета-лактамазы NDM-1 для субстратов ампициллин (KM = 185 мкM, kкат = 585 с–1) и меропенем (KM = 85 мкM, kкат = 160 с–1), которые согласуются с литературными данными. Впервые определены каталитические параметры для субстрата CENTA (KM = 14 мкM, kкат = 290 с–1).
УДК577.113.6, 577.151.4
КЛОНИРОВАНИЕ, ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА МЕТАЛЛО-β-ЛАКТАМАЗЫ NDM-1 И ИЗУЧЕНИЕ КАТАЛИТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ РЕКОМБИНАНТНОГО ФЕРМЕНТА / В.Г. Григоренко [и др.] // Вестник Московского университета. Серия 2. Химия .— 2016 .— №2 .— С. 9-15 .— URL: https://rucont.ru/efd/367343 (дата обращения: 26.04.2024)

Предпросмотр (выдержки из произведения)

№ 2 УДК 577.113.6, 577.151.4 КЛОНИРОВАНИЕ, ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА МЕТАЛЛО-β-ЛАКТАМАЗЫ NDM-1 И ИЗУЧЕНИЕ КАТАЛИТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ РЕКОМБИНАНТНОГО ФЕРМЕНТА В.Г. Григоренко, М.Ю. Рубцова, Е.В. Филатова, И.П. Андреева, Е.А. Мистрюкова, А.М. Егоров (кафедра химической энзимологии химического факультета МГУ имени М.В. Ломоносова; e-mail: vitaly.grigorenko@gmail.com) (KM = 185 мкM, kкат = 585 с–1) и меропенем (KM = 85 мкM, kкат = 160 с–1), которые согласуются с литературными данными. <...> Впервые определены каталитические параметры для субстрата CENTA (KM = 14 мкM, kкат = 290 с–1). <...> Антибиотики – препараты, способные обеспечить быструю защиту при инфицировании широким кругом агентов бактериальной природы. <...> Однако эффективность применения бета-лактамных антибиотиков снижается вследствие возникновения антибиотикорезистентности (появление и распространение микроорганизмов, устойчивых к антибиотикам). <...> Основной механизм резистентности у грамотрицательных бактерий обусловлен синтезом бактериальных ферментовбета-лактамаз (Е. <...> Проблема, связанная с устойчивостью микроорганизмов к бета-лактамным антибиотикам, является одной из самых актуальных в настоящее время [2]. <...> Бета-лактамазы представляют собой суперсемейство генетически и функционально различающихся ферментов, которые объединяет способность разрушать бета-лактамное кольцо, в результате чего антибиотик теряет свою антимикробную активность. <...> Металло-бета-лактамазы относятся к классу В и имеют в активном центре один или два иона цинка, участвующих в катализе. <...> Металло-бета-лактамазы разрушают почти все группы бета-лактамных антибиотиков, кроме монобактамов. <...> Они также устойчивы к применяемым в клинической практике известным ингибиторам бета-лактамаз молекулярного класса А, таким как сульбактам, тазобактам и клавулановая кислота [4]. <...> Недавно выделена новая металло-бета-лактамаза NDM-1, впервые обнаруженная в Klebsiella pneumoniae, которая способна гидролизовать практически все известные бета-лактамные антибиотики [5]. <...> Детальное <...>