336 УДК 577.113.6, 577.151.4 ИЗУЧЕНИЕ КАТАЛИТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ РЕКОМБИНАНТНЫХ β-ЛАКТАМАЗ ТЕМ-1 И ТЕМ-171 МОЛЕКУЛЯРНОГО КЛАССА А В.Г. Григоренко, И.П. Андреева, М.Ю. Рубцова, В.В. Бурмакин, И.В. Упоров, А.М. Егоров (кафедра химической энзимологии химического факультета Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова; e-mail: vitaly.grigorenko@gmail.com) (Km,каж = 23 мкM, kкат = 102 с–1). <...> Установлен конкурентный тип ингибирования рекомбинантных β-лактамаз ТЕМ-1 и ТЕМ-171 тазобактамом; значения констант ингибирования в реакции гидролиза субстрата CENTA составили 0,057 и 0,047 мкM для ТЕМ-1 и ТЕМ-171 соответственно. <...> Показано, что мутация (Val84Ile) приводит к уменьшению стабильности фермента ТЕМ-171 в 1,5 раза. <...> Ключевые слова: рекомбинантная β-лактамаза TEM-1, TEM-171, CENTA, кинетические параметры, тазобактам, конкурентный тип ингибирования. <...> Известно, что эволюция β-лактамаз развивается по двум основным механизмам – возникновение новых мутаций у известных ферментов и появление ферментов с новой структурой. <...> Это подчеркивает необходимость всестороннего изучения структурных особенностей и механизма действия β-лактамаз. <...> Комплексное исследование различных мутантных форм β-лактамаз и установление взаимного влияния мутаций на структурные особенности и каталитические параметры ферментов позволят перейти к созданию нового типа ингибиторов, а также найти новые способы преодоления резистентности микроорганизмов к антибиотикам. <...> -Лактамаза ТЕМ-1 относится к молекулярному классу А и является первым ферментом, выделенным в начале 1960-х годов из крови инфицированного пациента [5]. <...> -Лактамазы ТЕМ-типа имеют компактную структуру, образованную одной полипептидной цепью с молекулярной массой около 30 кДа, не содержат сахара и металлов в активном центре. <...> Анализ кристаллических структур β-лактамазы ТЕМ-1 и ее мутантов показывает, что точечные мутации приводят к небольшим структурным изменениям, таким как Созданы штаммы-продуценты и получены гомогенные препараты <...>