4 ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ХИМИЯ УДК 577.171.6:616-006:543.4 КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ИММУНОФЛУОРЕСЦЕНТНАЯ ОЦЕНКА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОФЛУОРИМЕТРИИ ЭКСПРЕССИИ ЭСТРОГЕНОВЫХ РЕЦЕПТОРОВ β В СОЛИДНЫХ ОПУХОЛЯХ ЧЕЛОВЕКА Т.А. <...> Э Жураев, Б.Е. Полоцкий, М.И. Давыдов (Российский онкологический научный центр им Н.Н. Блохина РАМН; e-mail: labmedchem@mail.ru) Проведена адаптация условий имунофлуоресцентного анализа эстрогеновых рецепторов β (ЭРβ) с использованием проточной цитофлуориметрии (ПЦФ) и моноклональных антител к ЭРβ фирмы “Abcam” (клон 14С8), специфических по отношению к N-терминальному домену белка ЭРβ человека. <...> Показана возможность фиксации клеток 4%-м раствором формальдегида и варьирования числа клеток в суспензии, что позволяет исследовать не только образцы опухоли, получаемые во время хирургических операций, но и при эндоскопическом обследовании больных и биопсии опухоли. <...> К использованию в клинической практике рекомендована продолжительность инкубации с первичными антителами в течение ночи (15– 20 ч.), а с вторичными – 1,5 ч, что оправдано с точки зрения большей чувствительности метода, сокращения расхода антител и удобства для персонала. <...> Для контроля активности антител в качестве референсной культуры рекомендованы клетки рака молочной железы линии MCF-7 и диапазон концентраций антител 0,06; 1,2 и 2,5 мкг/мл. <...> Для количественной оценки частоты экспрессии ЭРβ в солидных опухолях человека обосновано использование антител в области концентраций 1,2; 2,5 и 5 мкг/мл, которая включает область линейной зависимости флуоресцентного специфического окрашивания от концентраций антител и область достижения окрашивания всех клеток в исследуемой клеточной суспензии, а следовательно, и в исследуемой опухоли. <...> Тем не менее до настоящего времени в клинической практике обязательным является определение лишь ЭРα и только в ткани рака молочной железы. <...> Для определения уровня экспрессии ЭР наиболее часто применяется полуколичественный метод <...>