2·2014
Квартальный
научно-теоретический журнал
Основан в январе 1983 г.
РЕДАКЦИОННАЯ КОЛЛЕГИЯ:
Главный редактор С. В. КОСТРОВ
Зам. главного редактора Ю. М. РОМАНОВА
Ответственный секретарь Т. С. ИЛЬИНА
В. И. АГОЛ, А. Д. АЛЬТШТЕЙН, А. П. АНИСИМОВ, В. А. ГВОЗДЕВ,
В. Н. ГЕРШАНОВИЧ, А.Л. ГИНЦБУРГ, В. В. ДЕМКИН, Н. В. КАВЕРИН,
Е. Д. КУЗНЕЦОВА (научный редактор), С. А. ЛИМБОРСКАЯ, С. А. ЛУКЬЯНОВ,
Н. Ф. МЯСОЕДОВ, С. В. НЕТЕСОВ, Е. Д. СВЕРДЛОВ, Г. Б. СМИРНОВ,
Н. И. СМИРНОВА, В. З. ТАРАНТУЛ
РЕДАКЦИОННЫЙ СОВЕТ:
А. М. БОРОНИН (Пущино-на-Оке), В. И. ВОТЯКОВ (Минск),
А. А. ПРОЗОРОВ (Москва), Ю. К. ФОМИЧЕВ (Минск),
С. В. ШЕСТАКОВ (Москва)
Журнал утвержден в Перечне ведущих научных журналов и изданий, выпускаемых в Российской
Федерации, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертаций
на соискание ученой степени доктора наук (Бюллетень ВАК)
Журнал полностью переводится на английский язык в США издательством ALLERTON PRESS, INC.
МОСКВА «ИЗДАТЕЛЬСТВО "МЕДИЦИНА"»
Стр.1
СОДЕРжАНИЕ
ОбзОР
Давыдова Д.Ю., Зигангирова Н.А. Протеасомный белок Chlamydia
trachomatis как один из основных факторов патогенности
возбудителя ..................................
ЭКСпЕРИМЕНТАЛьНЫЕ СТАТьИ
Филиппова И.Н., Хрунин А.В., Лимборская С.А. Анализ делеции
гена GSTM1 в контексте гаплотипического разнообразия
геномного кластера GSTM в трех русских популяциях
Жданова С.Н., Огарков О.Б., Лац А.А., Зарбуев А.Н., Бадлеева
М.В., Унтанова Л.С., Савилов Е.Д. Выявление убиквитарных
и эндемичных генотипов Mycobacterium tuberculosis на
территории Республики Бурятии . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Быстрицкая E.П., Стенкова А.М., Портнягина О.Ю., Ракин
А.В., Рассказов В.А., Исаева М.П. Регуляция экспрессии
главного порина Yersinia pseudotuberculosis в условиях антибиотикового
стресса ..............................
Есмагамбетов И.Б., Седова Е.С., Щербинин Д.Н., Лысенко
А.А., Гарас М.Н., Шмаров М.М., Логунов Д.Ю. Конструирование
рекомбинантного аденовируса человека, экспрессирующего
гены консервативных антигенов вируса гриппа
А ионного канала М2 и нуклеопротеина . . . . . . . . . . . . . . .
Миронова Л.В., Афанасьев М.В., Басов Е.А., Урбанович Л.Я.,
Балахонов С.В. Ретроспективный макрорестрикционный
анализ штаммов Vibrio cholerae eltor, изолированных при
эпидемических осложнениях на Дальнем Востоке России
Афанасьев М.В., Кравец Е.В., Дугаржапова З.Ф., Такайшвили
В.Е., Половинкина В.С., Балахонов С.В. Сравнительный
мультилокусный VNTR- и SNP-анализ вакцинных
штаммов Bacillus anthracis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
8
12
17
22
29
36
3
CONTENTS
REVIEW
Davydova D. Yu., Zigangirova N. A. Chlamydia trachomatis
Proteasome Protein as One of the Significant Pathogenicity
Factors of Exciter
ExpErimEntal Works
Filippova I. N., Khrunin A. V., and Limborska S. A. Analysis
of a GSTM1 Gene Deletion in the Context of the GSTM
Genomic Cluster Diversity in Three Russian Populations
Zhdanova S. N., Ogarkov O. B., Laz A. A., Zarbuev A. N.,
Badleeva M. V., Untanova L. S., and Savilov E. D. Identification
of Ubiquitous and Endemic Mycobacterium tuberculosis
Genotypes in the Republic of Buryatia
Bystritskaya E. P., Stenkova A. M., Portnyagina O. Yu., Rakin
A. V., Rasskazov V. A., Isaeva M. P. Regulation of Yersinia
pseudotuberculosis Major Porin Expression in Response to
Antibiotic Stress
Esmagambetov I. B., Sedova E. S., Shcherbinin D. N., Lysenko
A. A., Garas M. N., Shmarov M. M., Logunov D. Yu.
Construction of Recombinant Adenoviral Vector Expressing
Genes of the Conservative Influenza Proteins M2 and
Nucleoprotein
Mironova L. V., Afanasev M. V., Basov E. A., Urbanovich
L. Yu., Balakhonov S. V. Retrospective Macrorestrictive
Analysis of the Vibrio cholerae eltor Strains Isolated at
Epidemic Complications in the Far East of Russia
Afanasev M. V., Kravets E. V., Dugarzhapova Z. F., Takaishvili
V. E., Polovinkina V. S., Balakhonov S. V. Comparative
Multilocus VNTR- and SNP-Analysis of Bacillus anthracis
Vaccine Strains
Адрес редакции:
Москва, 109029
ул. Скотопрогонная дом 29/1 (Автомобильный пр-д, д. 1),
подъезд 15
ОАО «Издательство "Медицина"»
Редакция журнала "Молекулярная генетика, микробиология и вирусология"
Тел. редакции: 8 495 678-63-95 (временно)
e-mail: molgenetika@yandex.ru
Зав. редакцией И. Х. Измайлова
ОТДЕЛ РЕКЛАМЫ
Тел./факс 8-495-678-64-84
E-mail: oao-meditsina@mail.ru
Ответственность
за достоверность информации,
содержащейся в рекламных
материалах, несут
рекламодатели.
Редактор Е. И. Константинова
Художественный редактор
А. В. Минаичев
Корректор Т. Д. Малышева
Переводчик С. К. Чаморовский
Все пpава защищены. Ни одна часть этого
издания не может быть занесена в память
компьютеpа либо воспpоизведена любым
способом без пpедваpительного письменного
pазpешения издателя.
Сдано в набор 24.01.14
Подписано в печать 23.03.14
Формат 60 Ч 88⅛.
Печать офсетная. Печ. л. 5,00.
Усл.-печ. л. 4,90. Уч.-изд. л. 5,50.
Заказ 106.
Подписной тираж номера 184 экз.
ЛР №010215 от 29.04.97 г.
E-mail: meditsina@mtu-net.ru
www.medlit.ru
Отпечатано в типографии ООО "Подольская
Периодика",
142110, г. Подольск, ул. Кирова, 15
© ОАО «Издательство "Медицина"», 2014
2
Стр.2
ОБЗОР
© Д.Ю. ДАВыДОВА, Н.А. ЗИГАНГИРОВА, 2014
УДК 579.882.11:579.22
Д.Ю. Давыдова, Н.А. Зигангирова
пРОТЕАСОМНЫЙ бЕЛОК ChLAMYDIA TRAChOMATIS КАК ОДИН Из ОСНОВНЫх
фАКТОРОВ пАТОГЕННОСТИ ВОзбУДИТЕЛЯ
ФГБУ «НИИЭМ им Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, 123098, Москва, Россия
Инфекции, передающиеся половым путем, являются глобальной
проблемой. Они могут стать причиной развития острых и
хронических форм различных заболеваний. Одним из самых
опасных и распространенных возбудителей является Chlamydia
trachomatis. Большинство хламидийных инфекций, для лечения
которых в настоящий момент не существует эффективных
препаратов, протекают бессимптомно. Ведущую роль в патогенезе
хламидийной инфекции играет белок CPAF, который подавляет
многие сигнальные пути клетки-хозяина и обеспечивает
длительное выживание патогена в организме человека. Обзор
посвящен описанию общей структуры протеасомного хламидийного
белка CPAF, его функционирования и роли в инфекционном
процессе. Представлены данные о значимости белка
CPAF в антихламидийном иммунном ответе и возможности его
использования в качестве мишени для создания перспективной
антихламидиозной вакцины для человека, а также для разработки
мишень-специфических лекарственных препаратов.
Ключевые слова: протеасомный белок CPAF; антихламидиозная
вакцина.
Хламидийные инфекции остаются актуальной
проблемой инфекционной патологии человека в связи
с их широкой распространенностью и ежегодным ростом
заболеваемости даже в развитых странах. Хламидии
вызывают большой спектр заболеваний: трахома,
урогенитальные инфекции, венерическая лимфогранулема,
респираторные инфекции, приводящие
к развитию тяжелых хронических патологий, среди
которых артриты, бесплодие, невынашивание плода,
а также астма и атеросклероз. Проблема контроля за
хламидийными инфекциями связана, во-первых, с
тем, что они очень часто протекают бессимптомно, но
при этом бессимптомные больные являются источником
распространения инфекции; во-вторых, в структуре
хламидийной инфекции хронические формы занимают
доминирующую долю, для лечения которых в
настоящий момент не существует эффективных препаратов.
Chlamydia
trachomatis – грамотрицательная бактерия
с облигатным типом паразитирования. Уникальный
цикл развития хламидий характеризуется
чередованием двух различных форм существования
– элементарных (ЭТ) и ретикулярных телец (РТ).
Элементарные тельца представляют собой метаболически
неактивные инфекционные частицы, которые
распространяются вне клетки. Внутри клеток элементарные
тельца трансформируются в ретикулярные.
Ретикулярные тельца являются вегетативной неинфекционной
формой хламидий. Они локализуются
в фагосоме, которая получила название «включение»,
располагающейся в перинуклеарном пространстве
клетки.
Инфекционный процесс начинается с адгезии ЭТ
на плазмолемме чувствительной клетки хозяина. ЭТ
3
индуцируют фагоцитоз и захватываются клеткоймишенью,
попадая в нее путем эндоцитоза. После
проникновения в клетку ЭТ оказываются внутри
фагосомы и блокируют ее слияние с лизосомами.
Благодаря этой особенности ЭТ не контактируют с
лизосомальными ферментами и беспрепятственно
размножаются внутри фагосомы. Внутри клеток ЭТ
трансформируются в РТ, которые затем многократно
делятся бинарным делением, уплотняются и трансформируются
в ЭТ. В конце цикла инфекционные ЭТ
занимают большую часть клетки-хозяина. Спустя 48
ч ЭТ в результате лизиса клетки или экструзии хламидийных
включений выходят наружу и заражают соседние
интактные клетки.
Одним из основных факторов патогенности хламидий
является протеасомный белок CPAF. Субстратом
для протеасомного белка CPAF является целый
ряд внутриклеточных белков инфицированной клетки
хозяина, играющих ключевую роль во взаимодействии
с патогеном, а также собственные бактериальные
белки.
Открытие белка CPAF способствовало изучению
специфических механизмов, реализуемых облигатными
внутриклеточными бактериями внутри инфицированной
клетки, для контроля защитных механизмов
клетки хозяина и возможности длительного
выживания патогена. Дальнейшее изучение молекулярных
механизмов действия белка позволит разработать
новые подходы к созданию профилактических
и терапевтических средств, эффективных в отношении
не только продуктивной, но и персистентной инфекции.
Строение
протеасомного белка CpaF
Протеасомный белок CPAF (chlamydial protease/
proteasome-like activity factor) является достаточно
консервативным белком среди различных видов
хламидий и синтезируется в хламидийных включениях
в форме неактивного зимогена с молекулярной
массой около 70 кД [1]. Однако в дальнейшем белок
претерпевает серию автокаталитических реакций гидролиза
и димеризацию, что является необходимым
для перехода протеасомного белка в активную форму.
В результате автопротеолиза белок расщепляется
на CPAFc и CPAFn домены с двумя промежуточными
фрагментами (CPAFc1 и CPAFc2), предшествующими
формированию CPAFc фрагмента (рис.1). Секвенирование
N-участка пептида показало, что в нативном
белке участок CPAFc начинается с Gly284, в то
время как CPAFc1 начинается с Arg243, а CPAFc2 – с
Val265 [1]. Оба фрагмента, N-концевой CPAFn (29 кД)
Стр.3