ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СПЕРМАТОЗОИДОВ В КАЧЕСТВЕ ПОДВИЖНОГО ВЕКТОРА ДЛЯ ПЕРЕНОСА ЧУЖЕРОДНОЙ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ В ЯЙЦЕКЛЕТКИ КРОЛИКА (90,00 руб.)

к-Ъ1Ш ВСЕРОССИИКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЖИВОТНОВОДСТВА ( ЕШ ) На правах рукописи КУЗНЕЦОВА Ирина Владимировна ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СПЕРМАТОЗОИДОВ В КАЧЕСТВЕ ПОДВИЖНОГО ВЕКТОРА ДЛЯ ПЕРЕНОСА ЧУЖЕРОДНОЙ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ИНФОР МАЦИИ В ЯЙЦЕКЛЕТКИ КРОЛИКА 0 3 . <...> Классическими методами трансгенеза являются: прямая микроинъекция ДНК в пронуклеус зиготы, ретровирусная инфекция предимплантационных эмбрионов, трансфекция эмбриональных ство ловых клеток с последующей пересадкой их в бластоцисту (Gros- veld, Kolllas, 1992; Brem, 1993). <...> Однако эти методы трудоемки и недостаточно эффективны по выходу трансгенных животных (Wall, Seidel, 1992). <...> Из сказанного следует, что в трансгенезе ощущается потребность в универсальном и эффективном векторе для доставки чужеродной ДНК. <...> Таким вектором могут служить сперматозоиды, то есть клетки, специализированные для переноса генетического материала в ооцит. <...> Использование сперматозоидов в качестве нативного вектора для введения экзогенной ДНК в яй цеклетки характеризуется естественностью, универсальностью, технологичностью и высокой эффективностью. <...> Определились следующие способы включения чужеродной ДНК (чДНК) в сперматозоиды: самопроизвольное поглощение и принуди тельное пропитывание (импрегнация) клеток чДНК. <...> Феномен спон танного поглощения экзогенной ДНК в отсутствии семенной плазмы был описан для зрелых спермиев (Lavitrano et al., 1989, 1992). <...> Показано,' что сперматозоиды способны переносить "захваченную" чужеродную ДНК в яйцеклетку. <...> Среди рожденных животных ЗОХ осо бей содержали экзогенную ДНК (Lavitrano et al., 1989). <...> В основе другого подхода (импрегнация спермиев чДНК) лежит использова ние различных химических и физических факторов, повышаюлшх эф фективность проникновения чужеродной ДИК в сперматозоиды. <...> 1993), а также предварительно заключают' чужеродную ДНК в липо сомы (липофекщш) (Rottmann et al.. <...> Однако в результате использования этих способов <...>