Актуальным является генетическая трансформация клеток в культуре,
позволяющая смоделировать системы для изучения закономерностей экс
прессии чужеродных генов, механизмов злокачественной трансформации,
процессов репликации и рекомбинации ДНК и получить клетки-продуценты
биологически активных белков , особенно для которых важны посттранс
ляционные модификации [Томилин Н.В., 1986; Глебов O.K., 1989; Дьяко
нов Л. <...> Большую ценность представляет получение животных со
стабильной интеграцией и экспрессией экзогенной ДНК в геноме (транс
генные животные) [Эрнст Л.К., 1989 ; Брэм Г. и др., 1993]. <...> В этой
связи большое внимание привлекает культура эмбриональных стволовых
клеток (ЭСК), выделенная из клеток внутренней клеточной массы эмбри
онов мышей [ Martin G.R.. <...> Генетически
трансформированные в культуре ЭСК остаются способными передавать
свои изменения через клетки зародышевого пути химерных животных и
представляют перспективный материал для геномных манипуляций у мле
копитающих. <...> № М Щ
I
- 2 Для реализации указанной цели были поставлены следующие задачи:
- оптимизировать существующие и разработать новые методы для
эффективного введения молекул экзогенных ДНК-плазмид в клетки млеко
питающих, культивируемые i n v i t r o , с учетом их морфо-физиологических
особенностей;
- получить стабильные генетически трансформированные клетки
млекопитающих с экспрессией НП экзогенных ДНК и продукцией чужерод
ного белка;
- исследовать возможность регуляции экспрессии трансгена в
культуре генетически трансформированных клеток;
- изучить возможность тестирования рекомбинантных векторов, как
трансформирующего фактора в модельной клеточной системе i n v i t r o ;
- показать возможность использования культуры эмбриональных
стволовых клеток мыши , как перспективного материала для получения
химерных животных и генетических манипуляций с ними;
- подобрать оптимальные условия для выделения <...>
СОЗДАНИЕ_МОДЕЛЬНЫХ_СИСТЕМ_КУЛЬТУР_КЛЕТОК_МЛЕКОПИТАЮЩИХ_ДЛЯ_РЕШЕНИЯ_ПРОБЛЕМ_БИОЛОГИИ_И_БИОТЕХНОЛОГИИ.pdf
На правах рукописи
САВЧЕНКОВА ИРИНА ПЕТРОВНА
СОЗДАНИЕ МОДЕЛЬНЫХ СИСТЕМ
КУЛЬТУР КЛЕТОК МЛЕКОПИТАЮЩИХ
ДЛЯ РЕШЕНИЯ ПРОБЛЕМ БИОЛОГИИ
И БИОТЕХНОЛОГИИ
03.00.23 — БИОТЕХНОЛОГИЯ
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени доктора
биологических наук
п. Дубровицы, Московской области
1997
Стр.1