На правах рукописи ЖАРЕХИНА АЛЛА ВАЛЕРИАНОВНА БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ СИСТЕМ АЦЕТИЛИРОВАНИЯ, ОКИСЛЕНИЯ И РЕГУЛЯЦИЯ ИХ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ КСИМЕДОНОМ 15.00.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Казань – 2008 Работа выполнена на кафедре аналитической химии, стандартизации и менеджмента качества в ГОУ ВПО «Казанский государственный технологический университет» Научный руководитель: доктор химических наук, профессор Гармонов Сергей Юрьевич Официальные оппоненты: доктор химических наук, профессор Плетенева Татьяна Вадимовна доктор фармацевтических наук, профессор Егорова Светлана Николаевна Ведущая организация: ГОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия Росздрава» Защита состоится «19» декабря 2008 года в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 212. <...> Биофармацевтический анализ играет важную роль в оценке эффективности, обеспечении безопасности и индивидуальной переносимости организмом человека лекарственных веществ (ЛВ). <...> При этом современные методы анализа ЛВ в биологических объектах представляют собой в своей совокупности своеобразный инструмент для проведения биофармацевтических исследований на различных этапах создания и клинического применения лекарственных средств. <...> Они включают определение фармако- и токсикокинетических параметров ЛВ, оценку и контроль состояния метаболических систем организма и целенаправленную регуляцию их ферментативной активности для достижения оптимального фармакологического эффекта. <...> Системы ацетилирования и окисления, находящиеся под контролем ферментов N-ацетилтрансферазы (NAT) и микросомальных оксидаз (МО), осуществляют биотрансформацию большого количества ЛВ. <...> Все это обуславливает необходимость разработки более совершенных методов биофармацевтического анализа для установления фармакокинетических параметров <...>
Биофармацевтический_анализ_метаболических_систем_ацетилирования,_окисления_и_регуляция_их_ферментативной_активности_ксимедоном._Автореферат.pdf
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ*
Актуальность исследования. Биофармацевтический анализ играет
важную роль в оценке эффективности, обеспечении безопасности и
индивидуальной переносимости организмом человека лекарственных
веществ (ЛВ). При этом современные методы анализа ЛВ в биологических
объектах представляют собой в своей совокупности своеобразный
инструмент для проведения биофармацевтических исследований
на различных этапах создания и клинического применения лекарственных
средств. Они включают определение фармако- и токсикокинетических
параметров ЛВ, оценку и контроль состояния метаболических
систем организма и целенаправленную регуляцию их ферментативной
активности для достижения оптимального фармакологического
эффекта.
Системы ацетилирования и окисления, находящиеся под контролем
ферментов N-ацетилтрансферазы (NAT) и микросомальных оксидаз
(МО), осуществляют биотрансформацию большого количества ЛВ.
Активность этих генетически детерминированных систем является
главным фактором, определяющим колебания концентрации лекарств
в организме пациентов, и, в конечном итоге, их ответ на лекарства,
применяемые при наиболее частых и социально значимых заболеваниях
(инфекционных, сердечно-сосудистой системы, органов дыхания,
печени).
Все это обуславливает необходимость разработки более совершенных
методов биофармацевтического анализа для установления
фармакокинетических параметров тест-препаратов этих процессов метаболизма
в биологических жидкостях. Последнее служит основой индивидуализации
дозирования ЛВ, учета биохимических фенотипов при
терапии различных патологических состояний и проведения мониторинга
лекарственных препаратов. При этом сложный многокомпонентный
состав биологических жидкостей особенно при низких содержаниях
анализируемых веществ требует использования избирательных и
чувствительных методов определения ЛВ. В то же время не менее значимым
является требование высокой производительности, надежности
и возможности получения большого объема аналитической информа*
В руководстве диссертационной работой принимала участие
кандидат химических наук Шитова Наталья Сергеевна
3
Стр.3
ции при проведении биофармацевтического анализа в клинических условиях.
Таким требованиям удовлетворяют хроматографические и оптические
методы, которые все более интенсивно используются в контроле
генетически детерминированных биохимических процессов метаболизма
ЛВ в организме человека.
В связи с этим биофармацевтические исследования активности
ферментов метаболизма и влияния на нее лекарственных препаратов
позволяют разработать алгоритмы персонализации лекарственной терапии,
совершенствовать требования к экспертизе новых препаратов, а
также снизить проявление нежелательных лекарственных реакций и
расходы на медицинскую помощь.
Диссертационная работа выполнялась при поддержке Грантов Президента
Российской Федерации (МД-2824.2005.3 и МД-2523.2008.3) и Академии
наук Республики Татарстан (проект 09-9.2-275/2006 (Г)).
Цель работы состояла в разработке комплекса хроматографических
методов биофармацевтического анализа для установления активности
метаболических систем ацетилирования и окисления организма
человека, а также оценке влияния лекарственного препарата ксимедона
на фармакокинетику тест-препаратов этих ферментных систем.
Материалы и методы исследования. В работе использована система
жидкостной хроматографии SHIMADZU (Япония) с программным
обеспечением LC Solutin, состоящая из насоса высокого давления LC20AB
для создания бинарного градиента, диодно-матричного детектора
SPD-M20A, флуориметрического детектора RF-10AXL, вакуум – дегазатора
DGU-20 A3, термостата колонок СТО-20А. Для хроматографического
разделения использованы колонки Summetry C18 (4,6 мм x
250мм x 5 мкм) с предколонкой Summetry C18 (3,9 мм x 20мм x 5 мкм),
Pecosphere C-8 ( 8,3 см x 4,6 мм) и Pecosphere C18 5 мкм ( 8,3мм x 4,6
мм). Для контроля pH мобильной фазы использовали pH-метр фирмы
Hanna (Румыния). В предварительных испытаниях для определения спектров
анализируемых веществ использовался сканирующий спектрофотометр
SPECORD 40 фирмы AnalitykJena (Германия). Для приготовления
элюентов, а также растворения стандартных испытуемых препаратов использовали
ацетонитрил ос.ч, метанол марки для хроматографии и сверхчистую
воду, полученную на установке MilliporWaters (США) из бидистилированной
воды. Спектрофотометрические измерения также проводили
на спектрофотометре СФ-26 и фотоколориметре КФК-3. Для пред4
Стр.4