НОВЫЕ ТЕХНОЛОГИИ ДЕТЕКЦИИ ТОЧЕЧНЫХ МУТАЦИЙ И АНАЛИЗА ПОЛИМОРФИЗМА ПОВТОРЯЮЩИХСЯ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ ГЕНОМОВ (90,00 руб.)

/f ' i~) (О tYJl На правах рукописи ШИЛОВ ИЛЬЯ АЛЕКСАНДРОВИЧ НОВЫЕ ТЕХНОЛОГИИ ДЕТЕКЦИИ ТОЧЕЧНЫХ МУТАЦИЙ И АНАЛИЗА ПОЛИМОРФИЗМА ПОВТОРЯЮЩИХСЯ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ ГЕНОМОВ Специальность 03.00.23 - Биотехнология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Москва - 2006 Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте сельскохозяйственной биотехнологии РАСХН (г. Москва). <...> Существующие методы детекции известных точечных мутаций можно разделить на две группы. <...> Точечные мутации обнаруживают по расщеплению анализируемых фрагментов ДНК соответствующими рестриктазами, с помощью аллельспецифической гибридизации или удлинения лраймера на один нуклеотид. <...> Эти методы основаны на лигировании специфических олигонуклеотидных зондов в месте потенциальной мутации и аллель-специфической полимеразной цепной реакции. <...> Кроме того, наиболее используемый в клинической диагностике метод первой группы, основанный на анализе полиморфизма длин рестрикционных фрагментов, имеет существенные ограничения по применению, поскольку требует наличия сайта рестрикции в месте предполагаемой мутации. <...> Методы второй группы являются более предпочтительными с точки зрения использования их в клинической практике, т.к. они позволяют проводить генотипирование в одну стадию, что сокращает время анализа и значительно упрощает анализ. <...> Кроме того, метод аллель-специфического олигонуклеотидного лигирования характеризуется низким выходом продукта реакции. <...> Таким образом, разработка новых, удобных в эксплуатации, быстрых, высокопроизводительных и надежных методов детекции известных точечных мутаций в ДНК является актуальной задачей современной биотехнологии. <...> В настоящее время молекулярно-генетические методы позволяют осуществлять идентификацию личности в судебно-медицинских <...>