МЕТОДИКА ПРОБОПОДГОТОВКИ ДЛЯ СЕЛЕКТИВНОЙ ДЕТЕКЦИИ ЖИВЫХ И ЖИЗНЕСПОСОБНЫХ КЛЕТОК ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ ПАТОГЕНОВ РЫБ Апробирована методика пробоподготовки для селективной детекции живых и жизнеспособных клеток патогенных микроорганизмов. <...> В экспериментах с чистыми культурами определяли титр клеток, оптимальный для пробоотбора с этидиум моноазидом (ЕМА), а на биологическом материале из соскобов больных рыб — концентрацию ЕМА, ингибирующую ПЦР. <...> Показано, что эффективный суммарный титр клеток для пробоподготовки с ЕМА должен быть ниже 106 кл./мл. <...> Обработка ЕМА клеточной суспензии нативных образцов концентрацией от 0,25 до 0,5 мкг/мл повышает чувствительность детекции микроорганизмов рода и в мультиплексной ПЦР, в то время как более высокие значения (5 мкг/мл и выше) ингибируют ПЦР. <...> Введение О ценка состояния среды обитания водных организмов молекулярногенетическими методами в режиме реального времени является необходимой для решения различных экологических задач. <...> Методы ПЦР-диагностики имеют ряд преимуществ перед классическими микробиологическими методами культивирования и идентификации бактерий — они требуют меньше времени для получения результата и эффективны как для детекции возбудителей заболеваний, особенно на ранних стадиях, так и для контроля состояния среды обитания водных организмов. <...> ПЦР-диагностика бактериальных инфекций позволяет корректно идентифицировать возбудителей тех *Адрес для корреспонденции: belkova@lin.irk.ru Н.Л. Белькова*, кандидат биологических наук, доцент, старший научный сотрудник лаборатории водной микробиологии, ФГБУН Лимнологический институт Сибирского отделения Российской академии наук; доцент кафедры физико-химической биологии биолого-почвенного факультета, ФГБОУ ВПО Иркутский государственный университет болезней, культивирование и определение которых по классическим биохимическим тестам затруднительно. <...> Ранее нами были проведены исследования микроорганизмов <...>