Научно-теоретический
медицинский
журнал
ISSN 0004-1947
4
2008
Стр.1
НАУЧНО-ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ
«ЭСКУЛАП»
Стр.2
RUSSIAN ACADEMY OF MEDICAL SCIENCES
INTERNATIONAL ASSOCIATION OF MORPHOLOGISTS
SCIENTIFIC THEORETICAL MEDICAL JOURNAL
ARCHIVES OF ANATOMY, HISTOLOGY, AND EMBRYOLOGY
Founded in June 1916 by A. S. Dogiel
VOLUME 133
4
ST. PETERSBURG • «AESCULAPIUS» • 2008
Стр.3
РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУК
МЕЖДУНАРОДНАЯ АССОЦИАЦИЯ МОРФОЛОГОВ
НАУЧНО-ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ
АРХИВ АНАТОМИИ, ГИСТОЛОГИИ И ЭМБРИОЛОГИИ
Основан в июне 1916 года А. С. Догелем
ТОМ 133
4
САНКТ-ПЕТЕРБУРГ • «ЭСКУЛАП» • 2008
Стр.4
Редакционная коллегия:
ГЛАВНЫЙ РЕДАКТОР — В.Л. БЫКОВ
Заместители главного редактора:
В.В. БАНИН, Э.И. ВАЛЬКОВИЧ, А.К. КОСОУРОВ
Ответственные секретари:
Т.И. ВИХРУК, В.В.МОЛЧАНОВА
И.Г. АКМАЕВ, Д.В. БАЖЕНОВ, Н.Н. БОГОЛЕПОВ, О.П. БОЛЬШАКОВ, Т.Г. БОРОВАЯ, В.К. ВЕРИН,
И.В. ГАЙВОРОНСКИЙ, Р.К. ДАНИЛОВ, Ю.И. ДЕНИСОВ-НИКОЛЬСКИЙ, Л.Л. КОЛЕСНИКОВ,
М.А. КОРНЕВ, С.Л. КУЗНЕЦОВ, В.В. КУЛИКОВ, Ф.Н. МАКАРОВ, Д.Б. НИКИТЮК, В.А. ОТЕЛЛИН,
А.В. ПАВЛОВ, Н.А. СЛЕСАРЕНКО, О.С. СОТНИКОВ, Е.И. ЧУМАСОВ
Editorial board:
EDITOR-IN-CHIEF — V.L. BYKOV
Deputy Editors:
V.V. BANIN, E.I. VALKOVICH, A.K. KOSOUROV
Executive Secretaries:
T.I. VIKHRUK, V.V. MOLCHANOVA
I.G. AKMAYEV, D.V. BAZHENOV, N.N. BOGOLEPOV, O.P. BOLSHAKOV, T.G. BOROVAYA, V.K. VERIN,
I.V. GAIVORONSKIY, R.K. DANILOV, Yu.I. DENISOV-NIKOLSKIY, L.L. KOLESNIKOV, M.A. KORNEV,
S.L KUZNETSOV, V.V. KULIKOV, F.N. MAKAROV, D.B. NIKITIUK, V.A. OTELLIN, A.V. PAVLOV,
N.A. SLESARENKO, O.S. SOTNIKOV, Ye.I. CHUMASOV
Состав Редакционного совета журнала:
Азнаурян А.В. (Ереван), Асфандияров Р.И. (Астрахань), Бородин Ю.И. (Новосибирск), Волкова О. В.
(Москва), Гриньон Ж. (Нанси, Франция), Дгебуадзе М.А. (Тбилиси), Дубовая Т.К. (Москва),
Зайцев В.Б. (Вятка), Зашихин А.Л. (Архангельск), Каган И.И. (Оренбург), Ковешников В.Г.
(Луганск), Кочетков А.Г. (Н. Новгород), Лобко П.И. (Минск), Логвинов С.В. (Томск), Мотавкин П.А.
(Владивосток), Мяделец О.Д. (Витебск), Никитин А.И. (Санкт-Петербург), Николаев В.Г.
(Красноярск), Ноздрин В.И. (Москва), Погорелов Ю.В. (Иваново), Самусев Р.П. (Волгоград),
Сапин М.Р. (Москва), Семченко В.В. (Омск), Слука Б.А. (Минск), Соколов В.В. (Ростов-на-Дону),
Стадников А.А. (Оренбург), Ухов Ю.И. (Рязань), Фомин Н.Ф.(Санкт-Петербург), Челышев Ю. А.
(Казань), Чучков В.М. (Ижевск), Шадлинский В.Б. (Баку), Шапоренко П.Ф. (Винница),
Швалев В.Н. (Москва), Шилкин В.В. (Ярославль), Шубич М.Г. (Краснодар), Ярыгин В.Н. (Москва)
Зав. редакцией И.М.Быкова
Корректор Л.Н.Агапова
Художественное оформление А.И.Приймака
Подписан в печать 03.07.2008 г. Формат бумаги 60 Ч 901/8. Печать офсетная.
Адрес редакции:
197110, Санкт-Петербург, а/я 328. Редакция журнала «Морфология».
E-mail: aesculap@mail.wplus.net
Журнал зарегистрирован Министерством информации и печати Российской Федерации. № 0110212 от 8 февраля 1993 г.
Отпечатано с готовых диапозитивов в типографии издательства «Левша».
© МОРФОЛОГИЯ, 2008
Стр.5
СОДЕРЖАНИЕ
Оригинальные исследования
КОРЖЕВСКИЙ Д.Э., ПЕТРОВА Е.С., КИРИК О.В.
и ОТЕЛЛИН В.А. Оценка дифференцировки
нейронов в эмбриогенезе крысы с использованием
иммуноцитохимического выявления даблкортина
КУЛЬЧИЦКИЙ С.В., ЯКУБОВИЧ Н.В., ЕМЕЛЬЯНОВА
А. А., ГАРКУН Ю.С., ПАШКЕВИЧ С.Г. и
КУЛЬЧИЦКИЙ В.А. Изменение ультраструктуры
нейропиля области СА1 гиппокампа крысят после
аппликации гиалуронидазы
ПУЗДРОВА В.А., КАРГИНА-ТЕРЕНТЬЕВА Р.А. и
ТАРАСОВА О.С. Влияние хронической гипотензии
на адренергическое нервное сплетение подкожной
артерии голени крысы и его регенерацию после
повреждения бедренного нерва
АКРАМОВ Э.Х., ВАСИЛЬЕВА О.И., ГАБИТОВ В.Х.
и ОМУРБАЕВ А.С. Анатомо-топографические
характеристики поджелудочной железы и
обоснование хирургических вмешательств при
деструктивных формах панкреатита
АНТОНОВА Е.И. Ультраструктурные проявления
первичной компенсаторно-приспособительной
реакции гепатоцитов животных с различной
системой терморегуляции после воздействия
гипертермии
ДИНДЯЕВ С. В. и ВИНОГРАДОВ С. Ю. Динамика
содержания гистамина в структурах матки крыс
по фазам полового цикла (флюоресцентногистохимическое
исследование)
КАГАН И.И. и БАЕВА И.Ю. Морфометрическая
характеристика плодов-близнецов на этапах
внутриутробного развития по данным
ультразвукового исследования
БАХОЛДИНА В.Ю. Морфометрическая
характеристика и типология глазницы человека
МОСКОВСКИЙ А.В. и ЛЮБОВЦЕВА Л.А.
Характеристика структур пульпы зуба, содержащих
биогенные амины, в норме и при патологии
(люминесцентно-гистохимическое исследование)
Конференция, посвященная
100-летию со дня рождения
заслуженного деятеля науки РСФСР,
академика АМН СССР
Дмитрия Аркадьевича Жданова
САПИН М.Р. и НИКИТЮК Д.Б. Дмитрий Аркадьевич
Жданов (к 100-летию со дня рождения)
САПИН М.Р. и БОЧАРОВ В.Я. Д.А. Жданов и учение о
лимфатической системе
Материалы конференции, посвященной
100-летию со дня рождения академика АМН
СССР Д.А. Жданова
47
50
53
7
11
CONTENTS
Original Investigations
KORZHEVSKIY D.E., PETROVA Ye.S., KIRIK O.V and
OTELLIN V.A. Evaluation of neuronal differentiation in rat
embryogenesis using immunocytochemical demonstration
of doublecortin
KULCHITSKIY S.V., YAKUBOVICH N.V., YEMELYANOVA
A.A., GARKUN Yu.S., PASHKEVICH S.G. and
KULCHITSKIY V.A. Changes of the neuropil ultrastructure
in CA1 hippocampal area of rat pups after hyalorunidase
treatment
15
PUZDROVA V.A., KARGINA-TERENTIYEVA R.A. and
TARASOVA O.S. Effect of chronic hypotension on adrenergic
nerve plexus of rat a. saphena and on its regeneration
after femoral nerve injury
20
AKRAMOV E.Kh., VASILYEVA O.I., GABITOV V.Kh. and
OMURBAYEV A.S. Anatomic-topographical characteristics
of the pancreas as the guidelines for the surgical
interventions in destructive forms of pancreatitis
24
ANTONOVA Ye.I. Ultrastructural manifestations of primary
compensatory-adaptive reaction of the hepatocytes
in animals with different system of thermoregulation
after exposure to hyperthermia
29
32
37
41
DINDYAYEV S.V. and VINOGRADOV S.Yu. Dynamics of
histamine content in the compartments of rat uterus
according to the stages of the estrous cycle (a fluorescent-histochemical
study)
KAGAN I.I. and BAYEVA I.Yu. Morphometric characteristic
of twin fetuses during the stages of the intrauterine
development according to the sonographic data
BAKHOLDINA V.Yu. Morphometric characteristic and
typology of the human orbit
MOSKOVSKIY A.V. and LIUBOVTSEVA L.A. Characteristic
of bioamine-containing dental pulp structures under
normal conditions and in pathology (a luminescent-histochemical
study)
Conference dedicated to the centenary
of birth of the Honored Scientist of the
Russian Federation, academician of
USSR Academy of Medical Sciences
Professor Dmitriy Arkadievich Zhdanov
SAPIN M.R. and NIKITIUK D.B. Dmitriy Arkadievich
Zhdanov (to the centenary of his birth)
SAPIN M.R. and BOCHAROV V.Ya. D.A. Zhdanov and the
studies of lymphatic system
Proceedings of the Conference dedicated to the
centenary of birth of Professor D.A. Zhdanov
Стр.6
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
© Коллектив авторов, 2008
УДК 611.018.8.013
Д.Э. Коржевский1, Е.С. Петрова1, О.В. Кирик1 и В.А. Отеллин1,2
ОЦЕНКА ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ НЕЙРОНОВ В ЭМБРИОГЕНЕЗЕ КРЫСЫ
С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ИММУНОЦИТОХИМИЧЕСКОГО ВЫЯВЛЕНИЯ ДАБЛКОРТИНА
1 Отдел морфологии (руков. ⎯ чл.-кор. РАМН проф. В.А. Отеллин) Института экспериментальной медицины РАМН;
2 лаборатория онтогенеза нервной системы (руков. ⎯ чл.-кор. РАМН проф. В.А. Отеллин) Института физиологии
им. И.П. Павлова РАН, Санкт-Петербург
Исследования, посвященные дифференцировке нейральных стволовых и прогениторных клеток ЦНС in vitro и in vivo,
требуют применения высокоспецифичных маркёров нейронов и глиоцитов. Цель настоящего исследования состояла в
изучении распределения маркёра дифференцирующихся нейронов, даблкортина (DCX), в структурах головного и спинного
мозга эмбрионов крысы в период до формирования кортикальной пластинки при помощи методов иммуноцитохимии,
световой и конфокальной микроскопии. В развивающейся нервной системе на 13–14-е сутки эмбриогенеза DCX обнаружен
в трех типах клеток: в нейронах, дающих реакцию на ядерный маркёр дифференцированных нервных клеток NeuN; в
мигрирующих и дифференцирующихся нейробластах; в части клеток, принадлежащих к популяции радиальных глиоцитов.
Достаточно высокая селективность экспрессии DCX позволяет рекомендовать использование этого маркёра для изучения
ранних стадий развития нервной системы млекопитающих.
Ключевые слова: эмбриогенез, головной мозг, спинной мозг, нейрогенез, даблкортин.
Изучение развития головного мозга и определение
механизмов регуляции нейрогенеза являются
актуальными фундаментальными проблемами
нейробиологии. Необходимый уровень исследований,
проводимых в этом направлении, невозможно
обеспечить без применения селективного маркирования
пролиферирующих, мигрирующих и
дифференцирующихся клеток ЦНС. В настоящее
время известно большое число генов, экспрессирующихся
в пролиферирующих нейроэпителиальных
клетках и в клетках, дифференцирующихся
по нейрональному и глиальному путям.
Специфичность внутриклеточной локализации
продуктов этих генов исследована недостаточно.
Так, существуют данные, что ряд часто использующихся
нейрональных маркёров могут синтезироваться
и глиальными клетками [7]. Широкое
распространение исследований дифференцировки
потомков нейральных стволовых клеток in vitro и
in vivo ставит задачу поиска надежных и, по возможности,
универсальных маркёров, позволяющих
селективно выявлять дифференцирующиеся
нейроны в различном материале (у эмбрионов, в
культуре ткани, в ЦНС в постнатальном онтогенезе,
в нейротрансплантатах).
Цель настоящего исследования ⎯ изучение
распределения одного из наиболее перспективных
маркёров клеток нейральной дифференцировки,
даблкортина (DCX), в структурах развивающейся
ЦНС в период до формирования кортикальной
пластинки.
Материал и методы. Исследование проведено на
15 эмбрионах крыс линии Вистар 13–х (n=6) и 14–х (n=9) суток
развития (Е13 и Е14). Содержание и умерщвление животных,
а также все экспериментальные манипуляции осуществляли
с учетом «Правил проведения работ с использованием экспериментальных
животных». Материал фиксировали в этанолформальдегиде
и цинк-этанол-формальдегиде [3], заливали в
парафин по общепринятой методике. Серийные срезы окрашивали
квасцовым гематоксилином. Иммуноцитохимически
DCX выявляли с помощью поликлональных кроличьих антител
(Abcam, Великобритания, разведение 1:500) и вторичных антител,
конъюгированных с полимером и пероксидазой (EnVision+,
DAKO, Дания). Маркёр пролиферирующих клеток ⎯ PCNA —
определяли, используя моноклональные антитела (клон PC10,
DAKO, Дания) [1]. Маркёр дифференцированных нейронов ⎯
ядерный антиген NeuN ⎯ определяли, используя моноклональные
антитела клона A60 фирмы Chemicon (США) в соответствии
с ранее опубликованным протоколом [2]. Визуализацию
прореагировавших первичных антител производили при помощи
диаминобензидинового хромогена DAB+ (DAKO, Дания).
После проведения иммуноцитохимических реакций часть срезов
докрашивали квасцовым гематоксилином либо астровым
синим.
Для конфокальной микроскопии использовали вторичные
антикроличьи антитела, конъюгированные с тетраметилродамин-изотиоцианатом
(TRITC), вторичные биотинилированные
антимышиные антитела и стрептавидин, конъюгированный
с флюоресцин-изотиоцианатом (FITC) фирмы
DAKO, Дания. Для конфокальной микроскопии ядра подкрашивали
флюоресцентным красителем NeuroTrace – deep red
(Molecular Probes, США). Полученные препараты исследовали
при помощи конфокального микроскопа Leica TCS SL
(Leica, Германия). Флюоресценцию индуцировали аргоновым
и гелий-неоновыми лазерами (длина волн 488, 543 и 633 нм).
Анализ и обработку полученных изображений проводили с
помощью общедоступной программы ImageJ (США).
7
Стр.8