НАУЧНО-ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ
«ЭСКУЛАП»
Стр.1
RUSSIAN ACADEMY OF MEDICAL SCIENCES
INTERNATIONAL ASSOCIATION OF MORPHOLOGISTS
SCIENTIFIC THEORETICAL MEDICAL JOURNAL
ARCHIVES OF ANATOMY, HISTOLOGY AND EMBRYOLOGY
Founded in June 1916 by A. S. Dogiel
VOLUME 131
3
ST. PETERSBURG • «AESCULAPIUS» • 2007
Стр.2
РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУК
МЕЖДУНАРОДНАЯ АССОЦИАЦИЯ МОРФОЛОГОВ
НАУЧНО-ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ
АРХИВ АНАТОМИИ, ГИСТОЛОГИИ И ЭМБРИОЛОГИИ
Основан в июне 1916 года А. С. Догелем
ТОМ 131
3
САНКТ-ПЕТЕРБУРГ • «ЭСКУЛАП» • 2007
Стр.3
Редакционная коллегия:
ГЛАВНЫЙ РЕДАКТОР — В.Л. БЫКОВ
Заместители главного редактора:
В.В. БАНИН, Э.И. ВАЛЬКОВИЧ, А.К. КОСОУРОВ
Ответственные секретари:
Т.И. ВИХРУК, В.В.МОЛЧАНОВА
И.Г. АКМАЕВ, Д.В. БАЖЕНОВ, Н.Н. БОГОЛЕПОВ, О.П. БОЛЬШАКОВ, Т.Г. БОРОВАЯ, В.К. ВЕРИН,
И.В. ГАЙВОРОНСКИЙ, Р.К. ДАНИЛОВ, Ю.И. ДЕНИСОВ-НИКОЛЬСКИЙ, Л.Л. КОЛЕСНИКОВ,
М.А. КОРНЕВ, С.Л. КУЗНЕЦОВ, В.В. КУЛИКОВ, Ф.Н. МАКАРОВ, Д.Б. НИКИТЮК, В.А. ОТЕЛЛИН,
А.В. ПАВЛОВ, Н.А. СЛЕСАРЕНКО, О.С. СОТНИКОВ, Е.И. ЧУМАСОВ
Editorial board:
EDITOR-IN-CHIEF — V.L. BYKOV
Deputy Editors:
V.V. BANIN, E.I. VALKOVICH, A.K. KOSOUROV
Executive Secretaries:
T.I. VIKHRUK, V.V. MOLCHANOVA
I.G. AKMAYEV, D.V. BAZHENOV, N.N. BOGOLEPOV, O.P. BOLSHAKOV, T.G. BOROVAYA,V.K. VERIN,
I.V. GAIVORONSKIY, R.K. DANILOV, Yu.I. DENISOV-NIKOLSKIY, L.L. KOLESNIKOV, M.A. KORNEV,
S.L KUZNETSOV, V.V. KULIKOV, F.N. MAKAROV, D.B. NIKITIUK, V.A. OTELLIN, A.V. PAVLOV,
N.A. SLESARENKO, O.S. SOTNIKOV, Ye.I. CHUMASOV
Состав Редакционного совета журнала:
Азнаурян А.В. (Ереван), Асфандияров Р.И. (Астрахань), Бородин Ю.И. (Новосибирск), Волкова
О.В. (Москва), Гриньон Ж. (Нанси, Франция), Дгебуадзе М.А. (Тбилиси), Дубовая Т.К. (Москва),
Зайцев В.Б. (Вятка), Зашихин А.Л. (Архангельск), Каган И.И. (Оренбург), Ковешников В.Г.
(Луганск), Кочетков А.Г. (Н. Новгород), Лобко П.И. (Минск), Логвинов С.В. (Томск), Мотавкин П.А.
(Владивосток), Мяделец О.Д. (Витебск), Никитин А.И. (Санкт-Петербург), Николаев В.Г.
(Красноярск), Ноздрин В.И. (Москва), Погорелов Ю.В. (Иваново), Самусев Р.П. (Волгоград),
Сапин М.Р. (Москва), Семченко В.В. (Омск), Слука Б.А. (Минск), Соколов В.В. (Ростов-на-Дону),
Стадников А.А. (Оренбург), Ухов Ю.И. (Рязань), Фомин Н.Ф.(Санкт-Петербург), Челышев Ю. А.
(Казань), Чучков В.М. (Ижевск), Шадлинский В.Б. (Баку), Шапоренко П.Ф. (Винница),
Швалев В.Н. (Москва), Шилкин В.В. (Ярославль), Шубич М.Г. (Краснодар), Ярыгин В.Н. (Москва)
Зав. редакцией И.М.Быкова
Корректор Л.Н.Агапова
Художественное оформление А.И.Приймака
Компьютерный набор Е.Г.Кропиной
Подписан в печать 11.04.2007 г. Формат бумаги 60 Ч 901/8. Печать офсетная.
Адрес редакции:
197110, Санкт-Петербург, Левашовский пр., 12, а/я 328. Редакция журнала «Морфология».
E-mail: aesculap@mail.wplus.net
Журнал зарегистрирован Министерством информации и печати Российской Федерации. № 0110212 от 8 февраля 1993 г.
Отпечатано с готовых диапозитивов в типографии издательства «Левша».
© МОРФОЛОГИЯ, 2007
Стр.4
СОДЕРЖАНИЕ
Обзорные и общетеоретические
статьи
ПЕРОВА М.Д., ШУБИЧ М.Г., КАРПЮК В.Б.,
ФОМИЧЕВА А.В. и МЕЛЬНИК Е.А. Возможности
использования стволовых стромальных клеток
в регенерации тканей пародонта и их взаимодействие
с тканевым микроокружением
Оригинальные исследования
ГОРБАЧЕВСКАЯ А.И. и ЧИВИЛЕВА О.Г. Структурная
организация неопределенной зоны промежуточного
мозга собаки
БАЖАНОВА Е.Д., МОЛОДЦОВ В.Н., ПОПОВИЧ И.Г. и
АНИСИМОВ В.Н. Возрастные особенности экспрессии
белков-маркеров апоптоза в нейроэндокринной
системе трансгенных мышей HER2/neu
ЧЕБОТАРЕВ С.Я. и ПЕТРИШИН В.Л.
Топографоанатомические аспекты нервосохраняющих
операций в височной области и боковом отделе
лица
АРХИПОВА Е.Г., ГРЕТЕН А.Г. и КРЫЛОВ В.Н.
Динамика репаративной регенерации кожного нерва
крыс при разной степени его травмирования
ЕМАНУЙЛОВ А.И., ШИЛКИН В.В. и МАСЛЮКОВ П.М.
Эфферентная иннервация шейного отдела трахеи в
раннем постнатальном онтогенезе
МОСКОВСКИЙ А.В. Идентификация клеток с нейральными
маркерами в пульпе зуба в норме и патологии
КУЛАЕВА
В.В. и БЫКОВ В.Л. Морфофункциональная
характеристика эпителия языка при введении пептидного
морфогена гидры
НИКИТЮК И.Е., ПОПОВ И.В., ПОЛЯНСКИЙ В.А. и
ДУДКИН В.И. Структура хряща метаэпифизарных
пластинок роста в условиях полной изоляции от
клеточно-гуморальных воздействий при пересадке в
мягкие ткани (экспериментальное исследование)
Конференция «Современные аспекты гистогенеза
и вопросы преподавания гистологии в
вузе», посвященная 100-летию со дня рождения
Л.И. Фалина
ГЕМОНОВ В.В. Лев Иосифович Фалин (к 100-летию
со дня рождения)
Материалы конференции «Современные аспекты
гистогенеза и вопросы преподавания гистологии
в вузе», посвященной 100-летию со дня рождения
Л.И. Фалина
16
22
26
30
33
37
41
45
7
CONTENTS
Surveys and Theoretical Papers
PEROVA M.D., SHUBICH M.G., KARPIUK V.B.,
FOMICHYOVA A.V. and MEL’NIK Ye.A. Application of
stromal stem cells for periodontal tissues regeneration
and their interaction with tissue microenvironment
Original Investigations
GORBACHEVSKAYA A.I. and CHIVILYOVA O.G. Structural
organization of the zona incerta in dog diencephalon
BAZHANOVA Ye.D., MOLODTZOV V.N., POPOVICH I. G.
and ANISIMOV V.N. Age-dependent peculiarities of
expression of apoptotic marker proteins in the neuroendocrine
system of HER2/neu transgenic mice
CHEBOTARYOV S.Ya. and Petrishin V.L. Topographicanatomical
aspects of nerve-saving operations in the
temporal area and in the lateral part of a face
ARKHIPOVA Ye.G., GRETEN A.G. and KRYLOV V.N.
The dynamics of reparative regeneration of rat skin
nerve after various degree of its damage
YEMANUILOV A.I., SHILKIN V.V. and MASLIUKOV P.M.
Efferent innervation of the cervical region of trachea
during the early postnatal ontogenesis
MOSKOVSKIY A.V. Identification of the cells expressing
neural markers in normal and pathological human dental
pulp
KULAYEVA V.V. and BYKOV V.L. Morpho-functional characteristic
of lingual epithelium after administration
of hydra peptide morphogen
NIKITIUK I.Ye., POPOV I.V., POLYANSKIY V.A. and
DUDKIN V.I. Structure of metaepiphyseal growth plate
cartilage as influenced by total isolation from cellular
and humoral influences after its transplantation into soft
tissues (an experimental study)
50
51
53
The Conference «Actual Aspects of Histogenesis
and the Problems of Histology Teaching at the
University» dedicated to the centenary of birth of
L.I. Falin
GEMONOV V.V. Lev Iosifovich Falin (to centenary of
birth)
Proceedings of the Conference «Actual Aspects
of Histogenesis and the Problems of Histology
Teaching at the University» dedicated to the centenary
of birth of L.I. Falin
Стр.5
ОБЗОРНЫЕ И ОБЩЕТЕОРЕТИЧЕСКИЕ СТАТЬИ
© Коллектив авторов, 2007
УДК 616.314.17-003.93
М.Д. Перова1, М.Г. Шубич2, В.Б. Карпюк3, А.В. Фомичева1 и Е.А. Мельник1
ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СТВОЛОВЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК
В РЕГЕНЕРАЦИИ ТКАНЕЙ ПАРОДОНТА И ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ
С ТКАНЕВЫМ МИКРООКРУЖЕНИЕМ
1 Краснодарский Центр пародонтологии и дентальной имплантации (руков. — проф. М.Д. Перова); 2 кафедра гистологии,
цитологии и эмбриологии (зав. — проф. Г.М. Могильная) Кубанского государственного медицинского университета;
3 Южно-Российский центр пластической хирургии (гл. врач — Ю.Ч. Коченов), г. Краснодар
В настоящем обзоре представлена эволюция идеи реституции тканей пародонта, начиная от концепции выборочного
клеточного заселения, стимуляции резидентных клеток-предшественников в локусе регенерации до использования
разнонаправленного потенциала стволовых стромальных клеток (ССК). Приведены эффекты стволовых клеток, выделенных
из эмбриона, костного мозга, жировой ткани, представлен иммунофенотип свежевыделенных ССК, предкультивированной
васкулярно-клеточной фракции в сравнении с иммунофенотипом культивированных ССК в разные сроки.
Проанализированы результаты изучения процессов пролиферации и цитодифференцировки трансплантированных ССК
в область глубоких дефектов тканей пародонта с помощью ядерного антигена пролиферирующих клеток и зеленого флюоресцирующего
белка. В ходе регенераторного процесса между трансплантированными клетками и микроокружением
моделируются взаимодействия через специальные мембранные клеточные рецепторы. Обсуждены вопросы координации
поведения клеток посредством адгезионных и коммуникативных контактов, которые обеспечивают сигнальную платформу
для управления клеточными функциями.
Ключевые слова: стволовые стромальные клетки, клеточная трансплантация, микроокружение, адгезионные и коммуникативные
взаимодействия.
Фундаментальная концепция роли стволовых
клеток в единстве систем крови и соединительной
ткани была выдвинута выдающимся отечественным
гистологом А.А. Максимовым в начале прошлого
столетия. После появления в свет его исторической
монографии [62], где исходной клеткой
гемопоэза была названа лимфоидная клетка
(ныне — кроветворная стволовая клетка с иммунофенотипом
CD34) и признания им возможности
дифференцировки этих клеток в фибробласты,
секретирующие коллаген, был перекинут мост к
современной проблеме восстановления различных
поврежденных некроветворных тканей у взрослых
с помощью стволовых стромальных клеток
(ССК) [18].
В последние десятилетия внимание исследователей
в области тканевой регенерации было
сосредоточено на стимуляции резидентных клеток-предшественников
с помощью митогенных
и хемотаксических воздействий полипептидных
факторов роста и посредством индуктивного влияния
морфогенов на дифференцировку эндогенных
соматических стволовых клеток в необходимые
клеточные линии [30, 53, 60, 83].
Эволюция регенеративных лечебных подходов.
Попытки регенерировать костную ткань
появились еще в начале 60-х годов прошлого столетия.
C.A. Bassett [22] и P.J. Boyne [25] применили
микропористый лабораторный целлюлозоацетатный
фильтр для заживления кортикальных
дефектов длинных костей и реконструкции лицевого
скелета. Их работы основывались на активно
изучаемом в то время поведении мягких тканей,
окружающих костный дефект. Временная имплантация
фильтра как барьера осуществлялась с
целью улучшения влияния местного окружения на
остеогенез за счет исключения из зоны костного
дефекта конечно дифференцированных клеток
волокнистой соединительной ткани. В результате
этого в очаге регенерации остаются «работать»
только костные клетки-предшественники (остеобласты,
фибробласты, экспрессирующие щелочную
фосфатазу, и др. клетки), поступающие преимущественно
из рядом расположенных сохраненных
костных структур. В течение десятка
лет эта идея не находила последователей. Только
после того, как А.H. Melcher [64] постулировал
ключевые биологические принципы определения
основных источников клеток, необходимых для
регенерации опорного аппарата зуба, в частности,
периодонтальной связки, концепция селективного
клеточного заселения легла в основу широко
используемого в пародонтологии метода направленной
регенерации тканей. T. Karring и соавт.
[47] и S. Nyman и соавт. [70] экспериментально и
клинически апробировали метод лечения тканей
7
Стр.7
ОБЗОРНЫЕ И ОБЩЕТЕОРЕТИЧЕСКИЕ СТАТЬИ
пародонта (поврежденных в результате хронического
воспалительно-деструктивного процесса) с
помощью барьерных мембран, ограничивающих
доступ к поверхности оголенного корня зуба клеток
с высоким репликативным потенциалом (эпителиоциты
десны и фибробласты соединительной
ткани десны), которые не принимают участия в
построении периодонтальной связки, корневого
цемента и кости альвеолы. С середины 90-х годов
ХХ в. наблюдается увеличение количества
исследований с морфологической верификацией
данных после использования различных барьерных
мембран для восстановления альвеолярной
кости челюстей и тканей пародонта [10–13, 15,
26, 52]. Анализ публикаций и данных собственных
исследований позволил заключить, что в
раннем периоде заживления барьерные мембраны
способны создавать адъювантные условия для
формирования органотипического регенерата для
восстановления как тканей пародонта, так и кости
альвеолярных отростков челюстей. Применение
различных остеокондуктивных материалов без
использования мембран приводит преимущественно
к инкапсуляции имплантированных гранул
и неадекватному исходу заживления тканей пародонта
[11].
Однако для активного привлечения клеток в
зону регенерации и высокого уровня их пролиферации
необходимо наличие достаточного объема
сохраненных жизнеспособных структур, ограничивающих
дефект, и хорошего кровоснабжения
региона, что в клинических условиях встречается
не так часто. В результате, например, развившегося
воспалительно-деструктивного процесса в
пародонте, когда потеря опорных тканей составляет
более 50%, наблюдается дефицит клеточных
форм, способных образовывать новые ткани взамен
утраченных [72]. По данным исследований,
применение мембран ограничено пародонтальными
2-, 3-стеночными и фуркационными (межкорневыми)
дефектами I–II классов (по классификации
П. Миллера) и небольшими костными
дефектами альвеолярного гребня челюстей [11,
12, 84, 89].
Улучшить качество восстанавливаемых тканей,
наряду с использованием полупроницаемых
мембран-фильтров, пытаются путем сочетания
деятельности сигнальных молекул, резорбируемых
материалов кондуктивного действия как
остова для формирования первичного (временного)
тканевого матрикса и трансплантации клеток
[38]. Если первые два компонента уже используются
в медицинской практике, то участие трансплантированных
клеток в восстановлении тканей
до сих пор плохо понятно и, естественно, пока
8
Морфология. 2007
ограничено. Применение подходящих клеток,
помещаемых непосредственно в зону тканевых
дефектов, представляет собой мощную терапевтическую
стратегию. Непременно это должны
быть неиммуногенные клетки, которые несложно
извлекать из донорского участка, обладающие
хорошей пролиферативной потенцией и способностью
дифференцироваться в различные клеточные
типы поврежденных тканей.
Наиболее перспективными в этой связи являются
стволовые клетки. Возможности эмбриональных
стволовых клеток к дифференцировке
в различные клеточные линии к настоящему
времени хорошо охарактеризованы [6, 71, 75].
Несмотря на то, что их пролиферативный потенциал
огромен, и эти клетки могут дифференцироваться
in vitro и in vivo в различные клеточные
типы — производные трех эмбриональных зародышевых
листков, существует масса этических,
технических и политических проблем, связанных
с их использованием. Кроме того, исследователи
указывают на высокий риск генетических аберраций
и канцерогенеза [59], развитие иммунных
осложнений и реакций отторжения, вероятность
инфицирования прионами, вирусами и иными
агентами в случаях использования тканей животного
происхождения [8].
ССК, их свойства. ССК костного мозга
взрослого организма, как потомки скелетогенной
мезенхимы, могут пролиферировать и дифференцироваться
не только в остеобласты, хондроциты,
теноциты и адипоциты, но и в эндотелиоциты, гладкие
миоциты, гепатоциты, нейроны и глиальные
клетки in vitro и in vivo [33, 73, 90]. Опубликованы
данные о перспективности применения ССК при
лечении артритов, остеопороза, несовершенного
остеогенеза, замещении костных дефектов, кардиомиопластике
и сердечной недостаточности,
дегенеративных заболеваниях нервной системы и
пр. [2, 17, 19, 21, 41, 46, 49]. Однако эксплантация
костного мозга может сопровождаться более
длительной болезненно стью в донорской зоне,
чем в участке регенерации, что имеет значение в
пародонтологии.
Судя по результатам современных исследований,
достаточное количество ССК можно получить
не только из костного мозга, но и из стромы
жировой ткани гиподермы [5, 90, 91]. Белая
жировая ткань, подобно костному мозгу, является
производным мезенхимы. Соединительнотканная
строма жировой ткани содержит не только ССК,
но и клетки эндотелия микрососудов, перициты
и гладкие миоциты [67]. ССК, выделенные из
жировой ткани, характеризуются фибробластоподобной
веретеновидной формой. Практически
Стр.8